超低温冷冻过程引起猪精子产生“似凋亡”变化

赵娜; 甄林青; 胡启蒙; 王亮亮; 李新红

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超低温冷冻过程引起猪精子产生“似凋亡”变化

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测定超低温冷冻保存过程能否诱导猪冻融精子产生“似凋亡”变化,探讨猪冻融精子活力降低的分子机理.利用Annexin-V/PI及JC-1荧光抗体试剂盒与流式细胞术相结合的方法,检测猪精子冷冻前后及不同培养时间冻融精子质膜中磷脂酰丝氨酸(PS)位置及线粒体膜电位(△ψm)变化;蛋白免疫印迹分析方法测定猪精子Bcl-2、Caspase-9及Caspase-3等“凋亡”因子含量变化.猪精子超低温冷冻保存后活性精子的比例(54.4％)显著低于鲜精组(87.9％)(P＜0.05),其中PS移位的精子“似凋亡”比例约为26.8％,同鲜精组(5.6％)相比增加21.2个百分点(P＜0.05);降温平衡及冷冻复苏后猪精子线粒体膜电位变化显著,其中低△ψm精子比例显著增加(P＜0.05);同新鲜精子(19.6％)相比,冷冻复苏后(79.4％)低△ψm精子比例提高59.8个百分点(P＜0.05);冻融精子中Bcl 2、Caspase-9及Caspase-3等凋亡因子活性显著高于鲜精子及降温平衡后的精子(P＜0.05),由此证明冻融过程能诱导猪精子进入凋亡状态.超低温冷冻保存能导致猪冻融精子质膜磷脂酰丝氨酸(PS)移位及线粒体膜电位降低,同时激发精子Bcl-2、Caspase-9及Caspase-3等凋亡因子活性,诱导成活冻融精子提前进入“似凋亡”状态,明显缩短冻融精子存活时间,这可能是猪冻精繁殖力降低的又一诱因.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2013年第11期|1766-1774|共9页
作者
赵娜; 甄林青; 胡启蒙; 王亮亮; 李新红;
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作者单位

上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;

上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;

上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;

上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;

上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;

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正文语种 chi
中图分类猪;繁殖生物技术;
关键词
低温保存; 似凋亡; 线粒体膜电位; 精子; 猪;

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