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非洲猪瘟病毒p54蛋白的高效表达及在ELISA中的应用

         

摘要

本研究旨在高效原核表达非洲猪瘟病毒(ASFV) p54蛋白,并进一步将其用于ELISA试验研究.参考非洲猪瘟病毒Con09/Bzz020株P54基因(E183L)的核苷酸序列,通过序列优化后合成P54基因,克隆至表达载体pET-30c(+),构建重组质粒pET-30c(+)-p54.结果显示,pET-30c(+)-p54有完整的阅读框架,可高效表达分子量约20.7 ku的p54蛋白,该蛋白表达稳定,具有可溶性,易于纯化,纯度高达900 μg·mL-1,所表达的p54蛋白的氨基酸序列与Con09/Bzz020株p54蛋白氨基酸序列相同;Western blot试验显示,表达的p54蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性反应;ELISA试验显示,p54蛋白针对ASFV阳性血清和阴性血清的P/N值为4.67.研究结果证实p54蛋白表达产量高,易于纯化,具有较好的抗原性,可用于非洲猪瘟ELISA诊断.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2013年第11期|1832-1837|共6页
  • 作者单位

    中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;

    中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

    中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

    中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;

    中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

    青岛农业大学动物科技学院,青岛266109;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S852.659.1;
  • 关键词

    非洲猪瘟病毒; p54蛋白; ELISA;

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