伪狂犬病病毒Fa株gp63(gⅠ)基因转移载体质粒的构建

张银梅; 郭万柱; 汪铭书; 颜其贵

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伪狂犬病病毒Fa株gp63(gⅠ)基因转移载体质粒的构建

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用限制性核酸内切酶Sall酶切已缺失gⅠ(gE)和部分gp63(gⅠ)的重组质粒PPB7-1DNA后,回收大小约6.0kb片段,经T4DNA连接酶连接后转化入大肠杆菌DH5α株,得到含gp63片段的转移载体质粒PP63.再以SV40早期启动子控制的大肠杆菌β-半乳糖苷酶(LacZ)基因作为报告基因,将其插入PP63中gp63基因起始密码子ATG下游的StuⅠ位点,在选择培养基中筛选出表达β-半乳糖苷酶的转化子,构建了以gp63为同源序列含LacZ报告基因的转移载体质粒,命名为PP63LacZ.在该转移载体质粒中,LacZ基因的两端分别与0.3kb和0.5kb的PRV gp63同源序列相连,经酶切、核酸分子杂交技术鉴定,结果表明该转移载体质粒的构建是成功的.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2001年第4期|338-344|共7页
作者
张银梅; 郭万柱; 汪铭书; 颜其贵;
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作者单位

四川农业大学动物生物技术中心,;

四川农业大学动物生物技术中心,;

四川农业大学动物生物技术中心,;

四川农业大学动物生物技术中心,;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病毒病;
关键词
伪狂犬病病毒; 转移载体; 重组; β-半乳糖苷酶基因;

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