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首页> 中文期刊> 《畜牧兽医学报》 >绵羊卵母细胞3种体外培养方式下外源添加血管内皮生长因子对FLT-1表达的影响

绵羊卵母细胞3种体外培养方式下外源添加血管内皮生长因子对FLT-1表达的影响

         
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本研究旨在探究外源添加血管内皮生长因子(VEGF)对绵羊卵母细胞体外成熟过程中FLT-1表达的影响.采用3种不同的体外成熟培养方式:裸卵单独培养、颗粒细胞与裸卵共培养以及卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocytes complexes,COCs)培养,外源添加5 ng· mL-1血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为试验组,不添加为对照组,采用qPCR、Western blot分别检测绵羊卵母细胞及颗粒细胞中FLT-1 mRNA和蛋白表达水平.结果表明:1)3种不同培养方式下,无论是否添加VEGF,颗粒细胞与卵母细胞中均能检测到FLT-1 mRNA和蛋白表达.添加VEGF能极显著降低共培养试验组12、16和20 h以及COCs试验组4、8、12、16和24 h颗粒细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01),能极显著降低共培养试验组12、20和24 h以及COCs试验组4、8和12 h卯母细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01),但会极显著增加裸卵试验组4～24 h卵母细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01).2)添加VEGF能够极显著降低共培养试验组和COCs试验组中颗粒细胞FLT-1蛋白4～12 h的表达量(P＜0.01),共培养试验组和COCs试验组中颗粒细胞FLT-1蛋白表达呈波动性下降趋势.COCs对照组和试验组颗粒细胞中FLT-1蛋白表达量在各时间点均高于同期共培养试验组.3)3种不同培养方式中,除裸卵试验组在20～24 h有一个急剧升高外,其余组中卵母细胞FLT-1蛋白表达量总体均呈波动性下降趋势.综上表明,卵母细胞和颗粒细胞中存在FLT-1的自分泌和旁分泌,卵母细胞中FLT-1 mRNA的表达与外围颗粒细胞的存在与否、数量多少以及包裹方式息息相关;在体外培养环境下,添加VEGF有效地激活了FLT-1 mRNA表达,但同时结合FLT-1蛋白以促进卵母细胞成熟的生物学效应,从而减少了FLT-1蛋白的表达.

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