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首页> 中文期刊> 《畜牧兽医学报》 >黔北麻羊SRD5A2基因干扰载体构建及其对产羔相关基因表达的影响

黔北麻羊SRD5A2基因干扰载体构建及其对产羔相关基因表达的影响

         
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摘要

旨在探究SRD5A2基因对山羊产羔性状相关基因表达的影响.本研究选择健康的(2～3岁)黔北麻羊经产母羊3只,体重约32 kg,采集卵巢组织并成功培养卵巢颗粒细胞.通过在线软件设计SRD5A2基因的4对siRNA干扰序列和1对阴性对照序列,连接pGPH1/GFP/Neo载体后,将构建成功的干扰载体转染至黔北麻羊卵巢颗粒细胞.利用qRT-PCR方法筛选出干扰效率最佳的载体,检测其对SRD5A2基因表达的影响.运用qRT-PCR检测沉默SRD5A2基因对山羊产羔性状相关基因骨形态发生蛋白15(BMP15)、生长分化因子9(GDF9)、骨形态发生蛋白1B(BM PR-1B)和卵泡刺激素β亚基(FS Hβ)表达的影响.结果表明,本试验在培养黔北麻羊卵巢颗粒细胞的基础上,成功构建了黔北麻羊SRD5A2基因的干扰载体,并筛选出shRNA-SRD5A2-1干扰效果最佳(P<0.01);抑制SRD5A2基因表达后,qRT-PCR检测产羔性状相关基因BMP15、BMPR-1B、GDF9和FSHβ的表达量均显著降低,BMP15的表达量极显著低于shRNA-NC对照组(P<0.01),BMPR-1B、GDF9和FSHβ的表达量显著低于shRNA-NC对照组(P<0.05).本研究成功构建了SRD5A2基因干扰载体并转染至卵巢颗粒细胞,发现体外沉默SRD5A2基因可抑制产羔性状相关基因的表达,提示SRD5A2基因与黔北麻羊产羔性状密切相关,本试验结果为进一步研究SRD5A2基因对黔北麻羊产羔性状的调控机制提供了基础.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2020年第12期|2980-2990|共11页
  • 作者

    洪磊; 陈祥; 唐文; 周志楠; 段志强; 赵佳福;

  • 作者单位

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室 贵州省动物遗传育种与繁殖重点试验室 贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院 贵阳550025;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S827.2;
  • 关键词

    黔北麻羊; SRD5A2基因; RNA干扰; 卵巢颗粒细胞; 产羔性状;

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