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玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化

         
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以毕赤酵母的醇氧化酶(AOX)为指标,以玻璃珠破碎法为对象,建立一种简单易行的毕赤酵母细胞的破碎工艺.考察玻璃珠用量、振荡时间、细胞液体积对毕赤酵母释放醇氧化酶的影响,进而利用Box-Behnken设计组合优化这3种因素,以响应面模型和一个2阶多项式方程拟合了这3种影响因素和醇氧化酶比酶活的关系.结果表明:玻璃珠破碎毕赤酵母的最佳条件为0.23 g玻璃珠、1.04 mL细胞液、103 s振荡时间.在最佳破碎条件下,醇氧化酶比酶活为8.86 U/mg.确定了玻璃珠破碎毕赤酵母细胞的条件,而且操作简便,可以同时处理多个样品,为重组毕赤酵母的筛选提供了有效方法.

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