• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文期刊> 《生物加工过程》 >环氧丙烷皂化废水活性污泥DNA提取方法的比较与优化

环氧丙烷皂化废水活性污泥DNA提取方法的比较与优化

         
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

The optimal extracting method for genomic DNA from the epoxypropane wastewater sample was investigated in this paper�Eleven methods were used to extract total DNA of the activated sludge samples, and they were sodium chloride solution⁃extraction buffer⁃lysozyme⁃sodium dodecyl sulfate( SDS) ,proteinase K⁃SDS method,SDS⁃repeated freezing and thawing method,Tris⁃EDTA⁃NaCl⁃polyvinylpyrrolidone(TENP) method,repeated freezing and thawing⁃SDS⁃proteinase K method, etc�According to the result from the analysis and comparison of these methods, the optimal experimental design was obtained, and it was the extraction buffer⁃lysozyme⁃SDS method which resulted in high quality genomic DNA�The results of single⁃factor experiments indicated that the optimal level for each factor was 10 mg/mL of lysozyme,100 g/L SDS, the reaction time for 30 min, the reaction temperature at 45 ℃. These data suggested sodium chloride solution⁃extraction buffer⁃lysozyme⁃SDS method was a simple and reliable DNA extraction method for the microbial communities in epoxypropane wastewater at the molecular level.%探索适宜的环氧丙烷废水中活性污泥微生物总DNA提取的方法并进行优化。采用11种方法提取环氧丙烷废水中活性污泥微生物总DNA，即NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶十二烷基磺酸钠（ SDS）法、蛋白酶K SDS法、SDS 反复冻融法、Tris EDTA NaCl 聚乙烯吡咯烷酮（PVP）（TENP）法和反复冻融 SDS 蛋白酶K法等。通过对这11种方法进行比较，以确定最佳试验方案并结合单因素法对最佳方案进行优化。琼脂糖凝胶电泳结果显示：NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶 SDS法提取DNA亮度高，有大片断DNA的存在且拖带较少，条带集中；酶法所提取的DNA效果仅次于提取缓冲液溶菌酶 SDS法，其他方案没有提取出DNA。单因子试验结果表明：10 mg／mL溶菌酶，100 g／LSDS，反应时间为30 min，反应温度为45℃时效果最佳。 NaCl溶液提取缓冲液溶菌酶 SDS提取法为环氧丙烷废水中微生物群落在分子水平上的研究提供了一种简便、可靠的DNA提取方法。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号