Pseudomonas sp.RT-1 低温脂肪酶的纯化及酶学特性

司圣乾; 陈彦; 刘燕雅; 冯蔚宗; 林琳

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Pseudomonas sp.RT1是从低温环境下分离的低温脂肪酶产生菌,对该菌产生的胞外脂肪酶(PL1)进行纯化,并对其酶学特性进行初步研究.Pseudomonas sp.RT1的发酵上清液经60%(NH4)2SO4沉淀、12~14 000截留相对分子质量(MWCO)透析袋透析、Sephadex G75分子筛和超滤浓缩后,得到了电泳纯的PL1.SDS-PAGE电泳估算其表观相对分子质量为4.43×104.对其酶学特性研究表明:PL1是低温碱性脂肪酶且对有机溶剂的耐受性较好.10～40 ℃内有较好的催化活性,最适作用温度为18 ℃;0～50 ℃该酶的稳定性较好,当温度超过50 ℃时则容易失活;最适作用pH为10.2,且pH在9～11时较稳定;该酶对有机溶剂的耐受性较好,10 mmol/L的Ca2+、K+、Na+和Fe3+对PL1的酶活力有促进作用,其中Ca2+促进作用最大,提高了146.07%,而10 mmol/L 的Cu2+、Co2+、Mn2+、Mg2+、Zn2+、Ba2+ 和Al3+ 对酶活力具有不同程度的抑制作用,其中Al3+抑制作用最强,抑制了98.55%;PL1对C链长度小于或等于12的短链脂肪酸形成的甘油三酯具有较强的水解能力;1 mmol/L的去氧胆酸盐(desoxycholate)和0.01%的Triton X100对酶活力具有提高作用,分别提高了30.74%和11.83%;0.01%的SDS和Tween-80、1 mmol/L的EDTA和尿素对酶活都有抑制作用,其中EDTA的抑制作用最大,抑制了80%.

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来源
《生物加工过程》 |2010年第6期|52-56|共5页
作者
司圣乾; 陈彦; 刘燕雅; 冯蔚宗; 林琳;
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作者单位

福建师范大学,生命科学学院,福州,350108;

福建师范大学,生命科学学院,福州,350108;

福建师范大学,生命科学学院,福州,350108;

福建师范大学,生命科学学院,福州,350108;

福建师范大学,生命科学学院,福州,350108;

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正文语种 chi
中图分类酶的分离与提纯;
关键词
Pseudomonas sp.; 低温脂肪酶; 纯化; 酶学特性;

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