酿酒酵母CICC1747醛糖还原酶基因的克隆及表达

曹丹燕; 李艳; 张清; 许琳; 严明

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酿酒酵母CICC1747醛糖还原酶基因的克隆及表达

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采用PCR技术以酿酒酵母CICC1747基因组DNA为模板扩增得到醛糖还原酶基因GRE3,插入到pET-15b载体的NdeⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建了酿酒酵母醛糖还原酶原核表达载体pET-15b-GRE3.将该载体转化到大肠杆菌菌株Rosetta(DE3)中,重组菌株用IPTG诱导表达,采用紫外分光光度法测定醛糖还原酶活力,并对其表达条件进行初步优化.SDS-PAGE电泳结果显示在分子量约37 kD处有明显的特异性蛋白质条带.发酵液的比酶活最高为54.94mU/mg,与酿酒酵母野生菌株相比提高了近10倍.

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来源
《生物加工过程》 |2006年第2期|46-50|共5页
作者
曹丹燕; 李艳; 张清; 许琳; 严明;
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作者单位

南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;

南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;

南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;

南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;

南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009;

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正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
酿酒酵母; GRE3基因; 醛糖还原酶; 克隆; 表达;

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