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重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白工程菌的高密度发酵

         
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摘要

重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)是治疗用生物制品Ⅰ类新药,具有多种功效,可用于治疗脑卒中.本文旨在优化TNHH工程菌发酵工艺,以实现该工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高效表达.笔者采用摇瓶试验和发酵罐发酵,从培养基碳、氮源配比正交试验入手,对工程菌生长和目的蛋白表达影响较大的单因子条件进行重点考察,如温度、pH、诱导策略、诱导剂和抗生素替代及补料流加方式.通过优化,6批50 L发酵工艺稳定,菌体密度(OD600)均能达79以上,目的蛋白表达量均在30％以上,质粒丢失率均低于10％.优化后的发酵工艺稳定,产量提高258％,质粒丢失率保持在10％以内,为TNHH项目进一步大规模生产奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《生物加工过程》 |2021年第3期|250-255|共6页
  • 作者

    冀成法; 马鲁南; 柳常青; 滕学东; 邵明学; 刘忠; 张贵民;

  • 作者单位

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

    鲁南制药集团股份有限公司 哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室 山东临沂276006;

    鲁南新时代生物技术有限公司 山东临沂273400;

    山东新时代药业有限公司 山东省蛋白类药物工程实验室 山东临沂273400;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 发酵工艺;
  • 关键词

    脑卒中; TNHH; 大肠杆菌; 高密度发酵; 质粒丢失率; 水蛭肽;

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