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猪牙本质基质蛋白提取物的分离纯化及其活性检测

         

摘要

目的:从猪牙胚中获得牙本质基质蛋白提取物(Dentin Matrix Protein Components,DMPCs)并检测其生物活性.方法:用4 mol/L盐酸胍和0.5 mol/L EDTA提取6月龄猪第二磨牙牙胚,获得DMPCs,用蛋白质液相色谱法分离纯化目的蛋白,SDS-PAGE检测分子量,MTT法测定DMPCs对人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)生长的影响,同时测定DMPCs对hDPSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.结果:牙本质基质蛋白分子量为94×103、38×103、20×103以及一些小分子.体外实验证实,细胞培养1 d,100 μg/mL上调hDPSCs ALP活性(P<0.05);培养3 d,100、150μg/mL组均可促进细胞增殖以及上调ALP活性(P<0.05).结论:牙本质基质蛋白提取物可以促进hDPSCs的增殖,提示混合蛋白组分相互作用可以促进细胞增殖分化.

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