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丹皮酚对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响

         

摘要

目的探讨丹皮酚对体外培养人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法CCK8法检测0.5,1,2,4,8 mmol/L丹皮酚作用24,48和72 h后A375细胞增殖水平。用0、1.25、2.5和5 mmol/L浓度丹皮酚作用24 h后,以Annexin-V/PI法观察A375细胞凋亡的变化、分别测定caspase 3,caspase 8和caspase 9的活性,并以Western印迹检测p53,NF-κB及相关蛋白水平的变化。结果与空白对照组比较,0.5,1,2,4,8 mmol/L丹皮酚作用24,48和72 h后均对A375细胞的增殖有抑制作用,且与时间、浓度呈依赖性。1.25、2.5、5 mmol/L丹皮酚在作用24 h时,A375细胞早期凋亡率由对照组的(3.11±0.53)%分别上升至(13.74±1.73)%、(25.95±0.57)%、(46.44±0.81)%,各组与对照组间差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。2.5 mmol/L和5 mmol/L作用组的caspase 3,caspase 8,caspase 9活性升高,且与对照组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。p53及Bax的蛋白水平随药物浓度的增加而升高,NF-κB、bcl-2、bcl-XL的蛋白水平随药物浓度增加而降低。结论丹皮酚对黑素瘤A375细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。可通过细胞内和细胞外两条途径发挥促凋亡作用,其机制可能与调节p53及NF-κB基因有关。

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