皮肤分枝杆菌DNA提取方法比较分析

闫桢桢; 姜海琴; 崔盘根; 王洪生; 孙建方

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皮肤分枝杆菌DNA提取方法比较分析

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目的比较分枝杆菌DNA提取的常用方法。方法分别采用传统的冻融法和两种试剂盒（A、B）对不同浓度结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌和耻垢分枝杆菌纯菌悬液及模拟标本进行总DNA提取。通过检测DNA纯度和PCR产物比较3种方法的提取效果,并应用临床皮肤组织标本进一步验证。结果 3种方法提取的分枝杆菌DNA均能用于PCR检测。试剂盒A获得的DNA纯度最高,冻融法其次,试剂盒B杂质最多;灵敏性检测显示3种方法可检测出的纯菌悬液最低浓度皆为10~2菌细胞/ml;对于模拟标本,在10~3菌细胞/ml时检出率为100%,在10~2菌细胞/ml时试剂盒A、B和冻融法检出率分别为60%（12/20）、55%（11/20）、55%（11/20）;临床标本检测结果提示,试剂盒B可用于石蜡标本DNA的提取,对分枝杆菌感染组织提取率同其它两种方法基本一致。结论试剂盒A通过多次过柱洗涤可快速获得分枝杆菌的优质基因组DNA,为实验研究及临床检测的首选;试剂盒B单次试剂处理除适用于石蜡标本提取DNA外,可用于新鲜组织标本的协同检测。

著录项

来源
《中华皮肤科杂志》 |2014年第6期||共页
作者
闫桢桢; 姜海琴; 崔盘根; 王洪生; 孙建方;
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作者单位

中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所;

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正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
分枝杆菌属; 组织提取物; DNA提取方法;

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