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SIX1和TGF-β对原代人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的影响

         
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cqvip:目的探讨原代培养的人喉鳞癌细胞中SIX1和转化生长因子-β(TGF-β)共同作用对上皮—间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法收集2016年1月—2018年1月于河北医科大学第一医院耳鼻咽喉科行喉鳞癌手术患者21例,均留存切除组织,并对其进行人喉鳞癌原代细胞培养,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向siRNA,并转染至原代人喉鳞癌细胞,成功转染后分5组,即未转染组、空转组、SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组。应用免疫组化荧光法及蛋白印记Western-blot法检测细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin的蛋白表达。PCR方法检测各组细胞中SIX1、TGF-β及E-cadherin mRNA表达。结果与未转染组比较,空转组细胞中SIX1、TGF-β、E-cadherin mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组E-cadherin蛋白及mRNA表达均上调,差异均有统计学意义(F/P=6.846/0.006、13.396/0.000、9.673/0.000)。SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组3组比较,E-cadherin mRNA及其蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论人喉鳞癌细胞上皮—间质转化呈SIX1及TGF-β依赖性。SIX1和TGF-β共同作用可能是人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的关键;SIX1和TGF-β是人喉鳞癌细胞转移潜能的重要标志。

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