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叶酸偶联白蛋白Cypate纳米粒介导光热治疗效应对荷人膀胱癌5637细胞裸鼠的抑瘤作用及其机制

         

摘要

目的探讨FA-BSA-Cypate纳米粒介导的靶向PTT效应对人膀胱癌5637细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其机制。方法免疫荧光法检测5637细胞叶酸(FA)受体分布;1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF)消耗量检测单态氧(1O2)生成。分4组:空白对照组(N组)、激光组(L组)、BSA-Cypate+激光组(BL组)、FA-BSA-Cypate+激光组(FL组)。流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)法测定热休克蛋白(Hsp)70、Hsp90蛋白表达变化;建立裸鼠膀胱癌5637细胞皮下移植瘤模型,观察FA-BSA-Cypate纳米粒介导的体内靶向抗肿瘤效应。应用GraphPad Prism 5.0统计软件,采用单因素方差分析及t检验。结果人膀胱癌5637细胞膜表达叶酸受体;808 nm激光照射,FA-BSA-Cypate纳米粒能促进1O2生成。FL、BL、L及N组细胞凋亡率分别为(56.912±5.457)%、(43.941±4.097)%、(12.923±2.489)%及(8.401±1.453)%,FL组与其他各组比较差异有统计学意义(F=203.502,P&0.05)。FL、BL、L及N组Hsp70、Hsp90蛋白相对表达分别是1.903±0.097及4.833±0.208;1.410±0.123及3.731±0.153;0.910±0.224及2.501±0.265;0.867±0.153及2.533±0.252;FL组与其他各组比较差异有统计学意义[F=25.180(Hsp70),P&0.05;F=74.530(Hsp90),P&0.05];荷瘤裸鼠模型提示FL、BL、L及N组肿瘤区域最高温度分别为(58.512±1.936)、(50.334±1.483)、(38.260±2.177)、(34.322±1.308) ℃,至第21天肿瘤相对体积分别是7.462±0.462、5.581±0.669、1.403±0.354、0.386±0.089,FL组较其他各组表现出更显著的靶向光热效应(F=198.612,P&0.05)及抗肿瘤增殖作用(F=285.403,P&0.05),差异均有统计学意义。结论 FA-BSA-Cypate纳米粒介导的PTT效应对人膀胱癌5637细胞具有显著的靶向杀伤效果,促进了5637细胞的凋亡及单线态氧的生成;FA-BSA-Cypate纳米粒介导的光热疗法对人膀胱癌5637细胞荷瘤裸鼠有抑瘤效果。

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