miR-214-3p通过靶向MFN2诱导胃癌细胞线粒体分裂及凋亡的机制

李合; 黄亮; 田由京; 陈禺

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目的探讨miR-214-3p靶向MFN2诱导胃癌细胞及线粒体分裂凋亡的作用及机制。方法收集43对胃癌组织及癌旁正常组织,采用基因芯片筛选胃癌组织及癌旁正常组织中差异表达的miRNAs并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测差异表miRNAs表达水平;此外,使用SGC7901细胞进行功能验证及机制研究,分为阴性对照(NC mimic)组,过表达miR-214-3p(miR-214-3p mimic)组,过表达miR-214-3p和线粒体融合蛋白(MFN)2(miR-214-3p mimic+MFN2)组,过表达miR-214-3p和线粒体抑制剂处理(miR-214-3p mimic+Mdivil)组;RT-qPCR检测miRNAs及MFN2表达;CCK-8实验检测细胞活力;TUNEL实验检测细胞凋亡;活性氧(ROS)、线粒体膜电位、三磷酸腺苷(ATP)及线粒体通透性转换孔检测线粒体功能;Western印迹检测细胞色素C、促凋亡蛋白[半胱氨酸蛋白酶(caspase)3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)]和抗凋亡蛋白Bcl-2,MFN2蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-214-3p与MFN2的靶向调控关系。结果与癌旁组织相比,芯片结果显示胃癌组织中差异倍数>2的10个miRNAs,其中胃癌组织中miR-214-3p表达明显降低;此外,与NC mimic组相比,miR-214-3p mimic组明显抑制细胞增殖,促进了细胞线粒体分裂及细胞凋亡,并抑制了MFN2的mRNA和蛋白的表达;双荧光素酶报告基因结果证明了miR-214-3p与MFN2靶向结合抑制荧光素酶活性;与miR-214-3p mimic组相比,同时过表达MFN2或使用Mdivil明显促进了细胞增殖,抑制了线粒体分裂及细胞凋亡,促进了MFN2的mRNA和蛋白的表达。结论miR-214-3p通过靶向并抑制MFN2表达,从而促进线粒体分裂并诱导胃癌细胞凋亡。

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来源
《中国老年学杂志》 |2023年第12期|2961-2967|共7页
作者
李合; 黄亮; 田由京; 陈禺;
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作者单位

海南医学院第一附属医院普通外科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
胃癌; miR-214-3p; MFN2; 线粒体分裂; 凋亡;

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