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首页> 中文期刊> 《中国老年学杂志》 >通过下调Lewis肺癌细胞Vav3基因的表达抑制细胞增殖

通过下调Lewis肺癌细胞Vav3基因的表达抑制细胞增殖

         
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目的 通过下调Lewis肺癌细胞Vav3基因的表达,观察Vav3表达对Lewis肺癌细胞体外增殖能力的影响.方法 设计合成3条针对小鼠Vav3的小干扰RNA序列(Vav3 -mus-163,Vav3-mus-309,Vav3-mus-375),瞬时转染至Lewis肺癌细胞,采用Real-time PCR和Western印迹方法检测干扰前后Vav3的表达,并挑选出下调效果最好的一条干扰序列进行细胞MTT实验,分别在24、、72 h观察下调Vav3基因表达后对Lewis肺癌细胞体外增殖能力的影响.结果 瞬时转染三条siRNA序列Vav3-mus-163、Vav3-mus-309、Vav3-mus-375,检测Vav3基因相对表达含量分别为1.1217 ±0.105 5、2.030 5 ±0.386 1和3.175 9 ±0.730 4.分别与Lewis肺癌细胞组(6.7045±0.183 3)和阴性对照组(6.083 7±0.317 2)相比,转染Vav3 -mus-163组和转染Vav3-mus-375组的Lewis肺癌细胞Vav3基因表达明显下调(P＜0.01,P＜0.05).在蛋白水平瞬时转染三条小于扰RNA序列Vav3的表达分别为0.112 8 ±0.005 8、0.203 2±0.008 3、0.293 8 ±0.219 1,与Lewis肺癌细胞组(0.408 3 ±0.0046)和阴性对照组(0.388 9±0.005 4)比较,转染Vav3-mus- 163组Vav3蛋白表达明显下调(P＜0.05).Vav3-mus-163序列能够在mRNA水平和蛋白水平显著下调Vav3的表达.MTT法检测瞬时转染Vav3-mus-163后72 h细胞的增殖率为78.4％,与阴性对照组细胞增殖率92.9％相比差异显著(P＜0.05).结论 下调Lewis肺癌细胞中Vav3的表达,可使癌细胞的增殖能力下降,说明Vav3具有促进Lewis肺癌细胞增殖的作用.Vav3表达与肺癌的发生发展有关联.

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