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GW9662对内脏脂肪素诱导的THP-1源性泡沫细胞的作用

         

摘要

目的 研究过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)γ拮抗剂GW9662对内脂素(visfatin)调控的人单核细胞(THP-1)源性泡沫细胞的作用.方法 THP-1诱导分化为巨噬细胞后,分为以下6组:visfatin组、1μmol/L GW9662+visfatin组、5μmol/L GW9662+visfatin组、10μmol/L GW9662+visfatin组、20μmol/L GW9662+visfatin组和低密度脂蛋白(LDL)组.各组采用油红O染色法检测泡沫细胞的数目,酶化学法测定各组细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量,免疫荧光法观察胞质中异硫氰酸罗丹明(TRITC)标记的腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)结合盒转运蛋白(ABC)A1和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的ABCG1荧光变化,并使用Western印迹法测定ABCA1和ABCG1蛋白的表达.结果 与LDL组相比,visfatin组和不同浓度GW9662组油红O染色阳性的泡沫细胞明显增多,胆固醇酯/总胆固醇比值明显增加,TRITC标记的ABCA1红色荧光和FITC标记的ABCG1绿色荧光含量降低,ABCA1和ABCG1蛋白表达明显降低(P<0.05).并且随着GW9662浓度增加,与visfatin组相比,不同浓度GW9662组油红O染色阳性的泡沫细胞明显增多(P<0.05),胆固醇酯/总胆固醇比值明显增加(P<0.05),红色荧光和绿色荧光含量降低,ABCA1和ABCG1蛋白的表达明显下降(P<0.05).结论 PPARγ拮抗剂GW9662能促进大量脂质蓄积在泡沫细胞中,提示PPARγ相关机制在调节巨噬细胞脂质平衡中发挥重要作用.

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