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LncRNA LINC00261靶向miR-182-5p对脑胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性的影响及其机制

         
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC00261对替莫唑胺(TMZ)耐药脑胶质瘤细胞耐药性的影响机制.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常脑组织、胶质瘤组织、胶质瘤细胞U251、TMZ耐药胶质瘤细胞U251/TMZ中LINC00261、miR-182-5p的表达;用脂质体法将TMZ+pcDNA组(转染pcDNA)、TMZ+pcDNA-LINC00261组(转染pcDNA-LINC00261)、TMZ+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、TMZ+anti-miR-182-5p组(转染anti-miR-182-5p)、TMZ+pcDNA-LINC00261+miR-NC组(共转染pcDNA-LINC00261和miR-NC)、TMZ+pcDNA-LINC00261+miR-182-5p组(共转染pcDNA-LINC00261和miR-182-5p mimics)转染至U251/TMZ细胞,并用10μg/ml TMZ处理,将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-182-5p组(转染miR-182-5p mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00261组(转染si-LINC00261)转染至U251细胞.四甲基偶氮唑盐(MTT)法、迁移实验(Transwell小室)法、Western印迹检测细胞的抑制率、迁移侵袭和细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21的蛋白表达.结果 与正常脑组织相比,胶质瘤组织中LINC00261表达显著降低,miR-182-5p表达显著升高(P<0.05).与U251相比,U251/TMZ中LINC00261表达显著降低,miR-182-5p表达显著升高,并且TMZ呈浓度依赖性明显提高细胞的抑制率,并显著上调细胞的IC50值(P<0.05).过表达LINC00261联合TMZ后,细胞的抑制明显提高,迁移侵袭能力明显降低,明显下调CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达,上调p21蛋白表达,且抑制miR-182-5p联合TMZ,具有相同的作用.miR-182-5p明显的抑制野生型LINC00261细胞的荧光活性.过表达miR-182-5p明显减弱了INC00261对U251/TMZ细胞TMZ耐药的作用.结论 LncRNA LINC00261调控TMZ耐药胶质瘤细胞的耐药性,其机制与LINC00261靶向调控miR-182-5p相关,将可为耐药脑胶质瘤的治疗提供新靶点.

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