奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞中DNA损伤修复基因GADD45β的诱导差异及调控机制

王佳玉; 杨卫平; 林大伟; 衣琳; 李军; 施敏敏; 沈柏用; 彭承宏; 邱伟华

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目的探索奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞的DNA损伤修复基因（GADD45β）诱导差异及可能调控机制。方法转染p53全序列建立Hep3B+p53"。体外合成GADD45β近端启动子序列群（-618至-314）,构建荧光素表达质粒,转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B+p53。以实时荧光定量PCR比较奥沙利铂对GADD45β表达诱导及其近端启动子活性影响差异;比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异;通过Caspase-3的表达变化测定凋亡的发生和发展。结果奥沙利铂对Hep3B中GADD45β诱导并不明显。转染p53全基因序列后,Hep3B+p53对奥沙利铂的敏感性明显增加,并呈现出剂量效应的正相关关系。荧光素分析提示奥沙利铂作用Hep3B+p53后的启动子NF-xB（618/+6）和E2F一1（一470/+6）活性较Hep3B明显增强约1.5倍和0.8倍。奥沙利铂能够更加明显地抑制Hep3B+p53的DNA合成能力和细胞克隆形成能力,100μmol/L奥沙利铂作用后Hep3B+p53DNA合成率为30.41%,对细胞克隆形成能力的抑制率则达到75.60%,与Hep3B相比差异显著。奥沙利铂作用后Hep3B+p53的Caspase-3能够迅速地启动凋亡的发生和发展。结论 p53对铂类化疗药物对肝癌细胞的GADD45β诱导具有重要作用,增强转录调节因子的表达水平是其可能的作用机制。

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来源
《中华肝胆外科杂志》 |2012年第2期||共页
作者
王佳玉; 杨卫平; 林大伟; 衣琳; 李军; 施敏敏; 沈柏用; 彭承宏; 邱伟华;
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作者单位

上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科、上海消化外科研究所;

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正文语种 chi
中图分类肝肿瘤;
关键词
肝癌; 奥沙利铂; DNA损伤修复基因; GADD45β; 肿瘤抑制基因; p53; 启动子;

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