乙型肝炎病毒X蛋白对细胞因子信号转导抑制分子-1CpG岛基因甲基化及其表达的影响

宋晓玲; 刘国珍; 谭德明; 李艳艳

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乙型肝炎病毒X蛋白对细胞因子信号转导抑制分子-1CpG岛基因甲基化及其表达的影响

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目的观察HBV X蛋白（HBx）对人源性非肿瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）表达的影响,并通过研究SOCS-1基因启动子区CpG岛甲基化的情况以探讨HBx影响SOCS-1表达的可能机制。方法本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA-X及空载体pcDNA3.0分别转染QSG7701细胞,经含G418的选择性培养基筛选获得稳定转染HBV-X基因的细胞克隆（pcDNA-X/QSG7701）及稳定转染空载体pcDNA3.0的细胞克隆（pcDNA3.0/QSG7701）。实时逆转录PCR、Western blot分别检测3种细胞SOCS-1 mRNA和蛋白的相对表达情况。甲基化特异性PCR检测三种细胞SOCS-1基因启动子甲基化状态。结果实时逆转录PCR结果显示pcDNA-X/QSG7701中SOCS-1 mRNA相对表达水平为0.3249±0.0536,明显低于pcDNA3.0/QSG7701的1.0543±0.1937和未转染的细胞QSG7701 mRNA相对表达水平（设为1.0）,三组比较,F=19.6,P＜0.05,差异有统计学意义。Western blot检测结果显示pcDNA-X/QSG7701中SOCS-1蛋白相对表达水平为0.1496±0.0106,明显低于pcDNA3.0/QSG7701的0.1984±0.0438及未转染的细胞QSG7701的0.2152±0.0816,三组比较,F=19.4,P＜0.05,差异有统计学意义。甲基化特异性PCR结果显示仅在pcDNA-X/QSG7701细胞株存在SOCS-1启动子区域的甲基化。结论HBx可下调SOCS-1的表达,使SOCS-1基因启动子CpG岛发生甲基化,这可能是HBx蛋白致肝细胞癌变的机制之一。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2013年第10期||共页
作者
宋晓玲; 刘国珍; 谭德明; 李艳艳;
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作者单位

中南大学湘雅医院传染病学教研室病毒性肝炎湖南省重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类 R341;
关键词
肝炎病毒; 乙型; DNA甲基化; 细胞因子信号转导抑制分子-1; 乙型肝炎病毒X蛋白;

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