丙型肝炎病毒核心蛋白DNA结合区的测定

关德玉; 伊达孝保

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丙型肝炎病毒核心蛋白DNA结合区的测定

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目的阐明丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的ＤＮＡ结合特性及其意义。方法在大肠杆菌中表达谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）融合ＨＣＶ核心蛋白不同长度片段，并进行纯化。经聚丙烯酸胺凝胶电泳后，通过更换缓冲液的方法将这些蛋白片段相对固定在凝胶中，用ｒ－３２Ｐ［４６６７－０００９１］ＡＴＰ标记人工合成的ＤＮＡ进行２次电泳，通过放射自显影检测核心蛋白的ＤＮＡ结合区。结果ＨＣＶ核心蛋白Ｎ端第１０～１６位氨基酸残基和第４６～７０位氨基酸残基可独立地结合ＤＮＡ，核心蛋白既能和单链ＤＮＡ结合又能和双链ＤＮＡ结合，对单双链ＤＮＡ的结合域相同。对所结合的ＤＮＡ序列无选择性。结论ＨＣＶ核心蛋白的Ｎ端含有两个ＤＮＡ结合区，结合区序列与核内转移信号的部分重迭以及对结合靶ＤＮＡ序列的非选择性可能是ＨＣＶ核心蛋白具有多功能的基础。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2001年第3期||共页
作者
关德玉; 伊达孝保;
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作者单位

解放军沈阳军区第202医院传染科;

日本金泽医科大学第一生物化学研究室;

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正文语种 chi
中图分类 R373.21;
关键词
肝炎病毒; 丙型; DNA结合蛋白; 病毒核心蛋白;

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