抗人Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体制备和鉴定

姚敏捷; 寇丽筠; 王天成; 黄汉朝

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抗人Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体制备和鉴定

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＜正＞以人胎盘提纯Ⅳ型胶原为抗原,免疫 BALB/c 小鼠,制备了 McAB,并对其特异性进行了鉴定,为临床广泛应用和研究奠定了基础.一、材料和方法实验动物由北医动物部提供,主要试剂为 Sigma 或国产分析纯试剂.方法:用本室提纯的 COL Ⅳ免疫动物,一周后尾部取血,经 ELISA 方法检测其血清抗体滴度.本实验共免疫四次,血清抗体滴度大于1/12 000.最后一次免疫两周后参照Zala,H 方法,取免疫好的 BALB/c 小鼠脾细胞与 SP2/0细胞在50%PEG 4 000溶液介导下进行细胞融合.ELISA 方法检测杂交瘤细胞上清液,筛选分泌抗 COL ⅣMcAB 的杂交瘤细胞株.结果共筛出46株阳性克隆,经有限稀释法将抗体滴度高的五个阳性株分别作了四次克隆化,其中三株亚克隆产物阳性率连续三次达100%,命名为3E6、3D4、4G8,三株细胞连续传代培养5个月分泌抗体能力不变,冻存6个月细胞复苏后仍能分泌抗体.

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来源
《中华肝脏病杂志》 |1997年第1期|64-64|共1页
作者
姚敏捷; 寇丽筠; 王天成; 黄汉朝;
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作者单位

吉林空军医学高等专科学校;

吉林空军医学高等专科学校;

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正文语种 chi
中图分类医学免疫学;
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