丹参酚酸B盐对大鼠肝星状细胞收缩以及对细胞骨架的影响

徐虹; 卢超; 平键; 周扬; 徐列明

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目的探讨丹参酚酸B盐（Sa1 B）对内皮素-1（ET-1）诱导的大鼠肝星状细胞（HSC）收缩以及对细胞骨架的影响。方法采用肝脏原位灌流酶消化法、Nycodenz密度梯度离心法分离大鼠HSC。培养细胞分为对照组、ET-1组、Sal B组和Y-27632组。ET-1组细胞予以10-8mol/L ET-1刺激,Sal B组或Y-27632组细胞在ET-1刺激前分别予以10-5mol/L Sal B或10-5mol/L Y-27632预处理30 min。用胶原凝胶收缩法观察HSC收缩情况。用甘油胶电泳和Odyssey荧光成像系统检测肌球蛋白轻链2（MLC2）的磷酸化水平。用FITC-鬼笔环肽特异性染肌动蛋白丝,观察Sal B对HSC中肌动蛋白骨架的影响。两组间比较用t检验,多组间比较用方差分析,Q检验。结果对照组凝胶面积为76.89%±3.84%,ET-1组凝胶与对照组相比明显收缩,面积为37.10%±5.10%（q=25.51,P＜0.01）。10-5mol/L Sal B或10-5mol/L Y-27632预处理能显著抑制HSC收缩,凝胶面积分别为67.01%±4.14%和77.28%±2.00%,与ET-1组相比,q值分别为16.97、25.76,P值均＜0.01,差异均有统计学意义。在基础状态下MLC2磷酸化水平为（0.35±0.05）mol PO4/mol MLC2;ET-1刺激后,MLC2磷酸化水平迅速上升,在ET-1刺激5min时为（0.87±0.04）mol PO4/mol MLC2,30min时达到高峰[（0.96±0.04）mol PO4/mol MLC2]。Sal B能显著抑制ET-1诱导的MLC2磷酸化,可使ET-1刺激30min时MLC2磷酸化水平下降63.1%（q=26.67,P＜0.01）,并且使肌动蛋白丝解聚,细胞骨架松弛。结论 Sal B能有效抑制ET-1诱导的大鼠HSC收缩。这种效应是基于Sal B抑制ET-1诱导的MLC2磷酸化以及抑制HSC中肌动蛋白纤维的聚合。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2014年第4期||共页
作者
徐虹; 卢超; 平键; 周扬; 徐列明;
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作者单位

1. 上海中医药大学附属曙光医院 2. 上海中医药大学肝病研究所 3. 肝肾疾病病证教育部重点实验室 4. 上海市中医临床重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类中药实验药理;
关键词
肝硬化; 收缩; 微丝;

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