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Smac基因过表达联合顺铂对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

         

摘要

目的探讨Smac基因过表达联合顺铂对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用脂质体介导的转染方法,将重组质粒pcDNA3.1+-LhSmac导人人肝癌细胞株SMMC-7721中,采用Western blot和流式细胞术检测转染前后Smac蛋白表达情况。转染24 h后分别加入终浓度为5、15、25μg/ml的顺铂诱导细胞凋亡。采用四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞的增殖抑制作用,吖啶橙-溴化乙锭荧光染色法和膜联蛋白V/碘化丙啶双染标记流式细胞术检测细胞凋亡。结果Western blot和流式细胞术检测结果证实转染后Smac蛋白表达明显增加(P<0.01)。与空白对照相比,Smac基因过表达可抑制癌细胞增殖,促进凋亡(P<0.01)。而且给予顺铂处理后,与空白对照组相比,细胞生长抑制率随剂量增加而显著上升,且转染Smac的细胞生长抑制率较相应未转染Smac的细胞明显升高(P<0.01)。吖啶橙-溴化乙锭荧光染色法和流式细胞术检测显示,转染Smac加顺铂处理组较单纯顺铂处理组细胞凋亡明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。这表明Smac基因过表达可增强顺铂对肝癌细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论促凋亡基因Smac可在肝癌细胞中过表达,抑制癌细胞的增殖和促进凋亡;而且过表达的Smac基因可增强癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,这为研究Smac在癌细胞凋亡过程中的调控作用以及肝癌化学治疗效果的改善提供了实验基础。

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