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合成多肽体外诱导乙肝病毒抗原特异性T杀伤细胞实验研究

         

摘要

目的及方法为探求 HBV 抗原特异性细胞毒 T 细胞(HBV-CTL),根椐 HBcAg 的 HLA 分子结合关键序列合成抗原多肽2段,分别与转铁蛋白(Tf)、抗 CD3单克隆抗体(CD3mAb)和 IL-2联合体外诱导 HBV-CTL,应用~3H-TdR 释放法分别测定 HBV-CTL 对 HBV DNA 转染的 HepG 2.2.15细胞特异性伤活性及无 HBV DNA 转染的 HePG2细胞的非特异性杀伤率。结果 HBV-CTL 对 HBV DNA 转染的2.2.15细胞特异性杀伤率分别为67%(多肽Ⅰ+Tf+CD3mAb+IL-2)、55%(多肽Ⅱ+Tf+CD3mAb+IL-2),明显高于 LAK 细胞组20%(IL-2)及 CD3-AK 细胞组34%(IL-2+CD3mAb+Tf)(P值<0.05)。而HBV-CTLs 对无 HBV DNA 转染的 HepG2细胞非特异性杀伤率,与 LAK 细胞及 CD3-AK 细胞相比,无显著性差异(P值>0.05)。HBV-CTLs 培养14-21天后,扩增倍数比 LAK 细胞高10倍,细胞表型分析显示 HBV-CTLs 是以 CD8+为主的异质细胞群。结论 HBcAg 合成多肽联合 Tf CD3mAb 及 IL-2,体外诱导 HBV-CTL,既可显著提高其增殖活性及增殖倍数,又可明显增强 HBV-CTL 对 HBV DNA 转染的2.2.15细胞的特异性细胞毒杀伤活性.

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