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首页> 中文期刊> 《中国组织化学与细胞化学杂志》 >siRNA沉默VEGF基因对大肠癌细胞生物学特性的影响

siRNA沉默VEGF基因对大肠癌细胞生物学特性的影响

         
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目的 研究VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌组织中的表达及与临床病理因素之间的关系;观察SiRNA干扰VEGF基因对人大肠癌细胞系Caco-2生物学特性的影响.方法 应用免疫组织化学S-P法,检测82例大肠癌及14例大肠正常黏膜组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达;以脂质体lip-2000为载体,用针对VEGF特异靶点的siRNA转染入人大肠癌细胞系Caco-2后,免疫细胞化学S-P法、Western Blot检测VEGF蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响;流式细胞技术检测细胞凋亡.结果 (1)大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率显著高于正常大肠组织(P＜0.05).VEGF的表达在有无淋巴结转移组和不同的Duke's分期中亦有显著差异(P＜0.05).(2)VEGF-siRNA转染Caco-2细胞后,免疫细胞化学结果显示转染VEGF-siRNA组阳性细胞呈弱阳性表达,明显减弱;Western blot结果显示VEGF-siRNA组细胞的蛋白条带亮度明显降低;MTT检测VEGF-siRNA组细胞生长出现明显的抑制(P＜0.05),不同时段(24h、48h、72h)肿瘤细胞增殖抑制率之间有显著差异(P＜0.05);流式细胞术检测VEGF-siRNA组出现明显亚二倍体峰,凋亡率显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 VEGF在大肠癌的进展过程中起重要作用.siRNA干扰VEGF基因能有效抑制人大肠癌细胞系VEGF蛋白表达,细胞增殖能力减弱,促进细胞凋亡.以VEGF基因为靶点,利用siRNA技术进行基因治疗有可能成为一种新的有效手段.

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