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微小RNA-146a-5p在新生隐球菌、脂多糖诱导THP-1细胞中表达的对比分析

         

摘要

目的 为探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)在新生隐球菌所致隐球菌性脑膜炎中的调控作用及机制奠定基础.方法 把体外培养的人单核细胞系THP-1细胞分成新生隐球菌刺激组和脂多糖(LPS)刺激组,分别用与细胞数量相同的灭活新生隐球菌(WM148)和浓度为1 mg/L的LPS刺激THP-1细胞,分别于0、3、6、9、12h收集上清液和细胞.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞miR-146a-5p的表达情况.结果 新生隐球菌诱导后,细胞中miR-146a-5p的表达对比对照组(0 h)明显升高(P<0.05),3h达到最高值,随后逐渐下降;上清液中TNF-α的表达在诱导后12h达到最高值,IL-6的表达各时间点变化不明显.LPS诱导后,miR-146a-5p的表达逐渐升高,12h达到最高值;上清液中TNF-α的表达3h后一直处于峰值;IL-6的表达逐渐增加,12 h达到最高值.结论 新生隐球菌、LPS诱导THP-1细胞炎性反应后,miR-146a-5p表达随时间延长呈现不同的规律,TNF-α、IL-6的动态变化表现不同的特点.表明miR-146a-5p参与新生隐球菌、LPS诱导THP-1炎性反应存在不同的调控机制.

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