Smad信号传递途径调节肾小管上皮细胞转分化实验

李瑾; 王宁宁; 谭若云; 郑东辉; 任胜利; 王笑云; 杨俊伟

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Smad信号传递途径调节肾小管上皮细胞转分化实验

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目的:研究转化生长因子β1(TGF-β)诱导人肾小管上皮细胞(HKC)转分化作用与其细胞内信号传递途径的关系.方法:以细胞间粘连蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)作为肾小管上皮细胞转分化的观察指标,借助细胞培养、蛋白印迹和基因转染等方法,检测TGF-β1引发的Smad信号途径的变化,和TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化作用.将含有Smad 7基因表达质粒转染HKC细胞,观察高表达的Smad 7蛋白对TGF-β1作用的影响.结果:实验结果表明①TGF-β1作用HKC细胞10 min即可磷酸化HKC细胞内Smad2/3蛋白,而且此作用可持续48h以上;②TGF-β1作用HKC细胞6h即可下调E-cadherin蛋白的表达,24h后能诱导该细胞表达α-SMA,其作用呈明显的剂量依赖关系;③转染Smad7表达质粒的HKC细胞,可拮抗TGF-β1诱导HKC细胞表达α-SMA以及下调E-cadherin蛋白表达的作用;④应用特异性MAP激酶抑制剂(PD98059和SC68376)和PI3激酶抑制剂(Wortmannin)均不能拮抗TGF-β1的作用.结论:TGF-β1诱导的上皮细胞转分化作用是依赖其引发的Smad信号途径,阻断该信号传递途径则能够拮抗TGF-β1的作用.

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来源
《肾脏病与透析肾移植杂志》 |2005年第3期|230-234|共5页
作者
李瑾; 王宁宁; 谭若云; 郑东辉; 任胜利; 王笑云; 杨俊伟;
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作者单位

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

江苏省人民医院肾脏科,南京医科大学第一附属医院,南京,210029;

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正文语种 chi
中图分类内科学;
关键词
Smad 转化生长因子β 上皮细胞转分化;

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