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脂肪组分染色质免疫共沉淀研究方法的建立

         

摘要

目的:优化肾周等部位脂肪组织各组分染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)的实验方案。方法:测试了脂肪各组分细胞分离和染色质提取的不同方法,以优化脂肪组分的ChIP实验方法。结果:通过优化ChIP实验各步骤,减少了细胞损失、防止油脂污染,从而提高了脂肪各组分染色质提取的质量和数量。从4只小鼠的5个脂肪部位成功获得ChIP实验所需的染色质,为成熟脂肪细胞和血管基质组分(stromal vascular fraction,SVF)细胞生成了高质量的组蛋白修饰图谱。结论:本研究通过优化适合脂肪组织的ChIP实验方法,提高了新鲜脂肪组分染色质的数量和质量,可为成熟脂肪细胞和SVF细胞生成高质量组蛋白修饰图谱。

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