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白藜芦醇对脑缺血损伤后星形胶质细胞炎症反应的影响及其神经保护作用研究

         

摘要

目的探讨白藜芦醇对小鼠脑缺血损伤后星形胶质细胞炎症反应的影响及其对损伤神经元的保护作用。方法 (1)60只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血组[应用双侧颈总动脉结扎法(BCCAO)制备成短暂性全脑缺血(TGI)模型,术前腹腔注射1.5%二甲基亚砜(DMSO)]及白藜芦醇处理组[应用BCCAO法制备成TGI模型,术前腹腔注射1.5%DMSO溶解的白藜芦醇(20mg/kg)],每组20只。应用焦油紫染色对小鼠海马CAI区神经元损伤情况进行评价。(2)将体外培养的星形胶质细胞分为星形胶质细胞糖氧剥夺(OGD)组(细胞培养液中加入DMSO后给予OGD处理)和星形胶质细胞白藜芦醇组(细胞培养液中加入DMSO和25μmol/L白藜芦醇后给予OGD处理),OGD4h复氧12h后应用ELISA法检测细胞培养液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6的含量;将体外培养的原代神经元给予OGD处理,再分为神经元OGD组(与星形胶质细胞OGD组细胞培养液共孵育)和神经元白藜芦醇组(与星形胶质细胞白藜芦醇组细胞培养液共孵育),应用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放量;应用免疫荧光染色检测各组神经元突起及各组星形胶质细胞中TNF-α、IL-6的表达。结果 (1)焦油紫染色显示,白藜芦醇处理组神经元损伤程度(1.50±0.34)较缺血组(3.17±0.31)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ELISA结果显示,星形胶质细胞白藜芦醇组中TNF-α、IL-6的含量[(160.2±18.41) pg/mL、(241.25±42.22) pg/mL]明显较星形胶质细胞OGD组[(282.4±17.01) pg/mL、(550.5±59.02) pg/mL]降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LDH检测显示,神经元白藜芦醇组的LDH释放量(0.30±0.05)明显低于神经元OGD组(0.62±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光双标染色显示,星形胶质细胞白藜芦醇组的星形胶质细胞中TNF-α、IL-6染色阳性表达较星形胶质细胞OGD组明显降低,神经元白藜芦醇组中神经元突起表达较神经元OGD组明显增加。结论白藜芦醇对小鼠脑缺血损伤具有神经保护作用,其机制可能与白藜芦醇下调星形胶质细胞中炎性因子TNF-α、IL-6分泌有关。

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