腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统在Cfos启动子调控下对胶质瘤细胞的杀伤作用

王浩; 潘建青; 胡继良; 冯诣; 宋伟健; 罗杰; 刘欣民; 魏强国; 洪全球; 翟宝进

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目的构建人Cfos启动子调控的单纯疱疹病毒（HSV）-胸苷激酶（TK）自杀基因重组腺病毒载体,观察其介导的HSV-TK/更昔洛韦（GCV）系统对胶质瘤细胞的杀伤作用。方法构建重组腺病毒载体Ad-Cfos-TK-IRES-hr绿色荧光蛋白（GFP）、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP,转染至HEK293细胞获得重组腺病毒Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP,荧光计数法检测病毒滴度;将病毒感染U251、U87细胞,荧光显微镜下观察GFP的表达。将病毒感染U251、U87细胞,24h后加入1000、100、10、1、0.1、0.01、0μmol/L GCV作用48 h,CCK-8法检测各组细胞抑制率。结果成功构建重组腺病毒载体pDC315-CMV-TK-IRES-hrGFP、pDC315-CFOS-TK-IRES-.hrGFP。荧光计数法检测显示2种腺病毒滴度均达1×1010PFU/mL。在病毒感染复数（MOI）为100、GCV浓度为1、10、100、1000μmol/L时,转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U251细胞抑制率分别为（24.18±6.01）%、（30.39±9.67）%、（57.07±9.29）%、（94.50±3.48）%,转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U87细胞细胞抑制率分别为（9.78±2.24）%、（86.33±5.06）%、（98.48±0.79）%、（98.76±0.93）%。结论腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统在Cfos启动子调控下在体外可以有效杀伤胶质瘤细胞。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2015年第6期||共页
作者
王浩; 潘建青; 胡继良; 冯诣; 宋伟健; 罗杰; 刘欣民; 魏强国; 洪全球; 翟宝进;
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作者单位

1. 深圳市南山区人民医院神经外科 2. 深圳市人民医院神经外科;

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正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
神经胶质瘤; 基因治疗; 腺病毒; Cfos启动子;

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