MEK2基因siRNA的构建和筛选及其在人胶质瘤细胞中的表达

贺华; 陶帮宝; 胡国汉; 骆纯; 李兵; 王君玉; 卢亦成

首页> 中文期刊> 《中华神经医学杂志》 >MEK2基因siRNA的构建和筛选及其在人胶质瘤细胞中的表达

MEK2基因siRNA的构建和筛选及其在人胶质瘤细胞中的表达

开具论文收录证明 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的构建MEK2-siRNA表达质粒,转染胶质瘤U87细胞并研究其对内源性MEK2表达的敲减效果。方法化学合成4条60个碱基并能转录siRNA发卡结构的DNA寡核苷酸,退火形成2条双链DNA,以T4连接酶接入BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPER.basic载体中。EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定出阳性重组克隆,抽提质粒并转染胶质瘤U87细胞,Western blotting检测MEK2蛋白的表达水平。结果酶切鉴定和测序结果表明MEK2-siRNA质粒构建成功,Western blotting结果筛选出较好的MEK2-siRNA质粒。未转染阴性对照质粒MEK2表达水平为0.105±0.023,转染筛选质粒后表达水平为0.030±0.006。结论成功构建了MEK2-siRNA真核表达载体,并证明其能下调胶质瘤U87细胞中MEK2蛋白的表达水平,为RNA干扰技术应用于胶质瘤的基因治疗提供了一定的实验依据。

著录项

来源
《中华神经医学杂志》 |2011年第4期||共页
作者
贺华; 陶帮宝; 胡国汉; 骆纯; 李兵; 王君玉; 卢亦成;
展开▼
作者单位

1. 第二军医大学长征医院神经外科上海神经外科研究所干细胞与医学研究生创新实验中心 2. 第二军医大学长征医院神经外科上海神经外科研究所;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
RNA; 小分子干扰; 神经胶质瘤; MEK2; 真核表达载体;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 用siRNA表达框架抑制CYP450 2E1基因转录筛选高效的RNA干扰位点及构建该位点的siRNA表达载体 [J] . 徐芸 ,李继昌 ,万志红 . 胃肠病学和肝病学杂志 . 2006,第005期
2. livinβ-siRNA表达载体的构建及其在人星形胶质瘤细胞中的稳定表达 [J] . 石全红 ,詹傲 ,崔荣周 . 局解手术学杂志 . 2013,第003期
3. siRNA沉默KLF4基因表达对人胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响 [J] . 郭春梅 ,赵旭 . 肿瘤药学 . 2019,第004期
4. 应用siRNA敲低MMP-9基因表达后对人U251胶质瘤细胞增殖和侵袭的作用 [J] . 宋剑 ,焦保华 ,王惊涛 . 中国神经精神疾病杂志 . 2008,第005期
5. 针对HBV S基因发夹状siRNAs表达载体的构建及其在HepG2215细胞中对HBV基因表达的抑制作用 [J] . 范旭 ,何升松 . 实用肝脏病杂志 . 2006,第004期
6. 用siRNA表达框架抑制CYP450 2E1基因转录筛选高效的RNA干扰位点及构建该位点的siRNA表达载体 [C] . 徐芸 ,万志红 ,李继昌 . 第五届全国肝脏病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议 . 2006
7. 新型siRNA表达载体、随机siRNA文库的构建及基于随机siRNA文库的细胞增殖相关基因筛选 [A] . 张丽姝 . 2005

MEK2基因siRNA的构建和筛选及其在人胶质瘤细胞中的表达

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅