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RNA干扰抑制端粒酶反转录酶对晶状体上皮细胞增殖的影响

         

摘要

目的 探讨RNA干扰(RNAi)抑制端粒酶反转录酶(TERT)对晶状体上皮细胞(LEC)增殖的影响.方法 收集培养的LEC和视网膜色素上皮细胞(RPEC),用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测二者内源性TERT的表达差异;人工合成TERT小分子干扰RNA(siRNA)片段,用LipofectamineTM2000转染LEC,实时PCR检测TERT基因表达的变化.LipofectamineTM 2000 TERT siRNAi持续转染LEC和RPEC 96 h,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测TERT siRNAi对LEC和RPEC增殖的影响.结果 RPEC中未见TERT表达,LEC中有低水平TERT表达.TERT siRNA转染LEC 48 h后,siRNA组TERT相对表达水平(0.20±0.01)与阴性对照组(1.00±0.03)相比,差异有统计学意义(P<0.05).TERT siRNA转染LEC和RPEC 96 h后,CCK-8试剂盒检测细胞的增殖抑制情况显示:LEC siRNA组LEC活性(0.55±0.04)与LEC阴性对照组(0.79±0.02)相比,差异有统计学意义(P<0.05);转染的RPEC siRNA组RPEC活性(1.13±0.04)与阴性对照组RPEC活性(1.16±0.01)相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 较长时间RNAi TERT能有效抑制LEC增殖,但对RPEC无明显抑制作用.

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