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压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA及其蛋白表达的影响

摘要

目的研究不同压力下纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)mRNA及其蛋白质的表达,探讨青光眼患者RGCs损伤的机制.方法将纯化培养的Sprague-Dawley大鼠RGCs随机分成对照组和A、B、C、及D组,分别在0、20、40、60、及80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 KPa)的压力下培养48 h后,用原位杂交、RT-PCR及Western blot法检测RGCs中iNOS mRNA及其蛋白质的表达,并用全自动图像分析系统测定其吸光度值.结果纯化培养的RGCs纯度为98%.原位杂交、RT-PCR及Western blot法检测RGCs中iNOS mRNA及其蛋白表达结果变化均呈平行关系:对照组无表达,A组有较弱的表达信号,B、C及D组表达逐渐增强;3项检测结果用全自动图像分析显示:A组iNOS mRNA均弱表达,与对照组比较差异有显著意义(P<0.05);B、C及D组均为强表达,各组与对照组比较差异有非常显著意义(P<0.01). 结论压力可激活RGCs中iNOS mRNA及其蛋白质的表达,由此产生过量的NO损伤RGCs,成为青光眼的发病因素之一.

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