原位杂交

摘要： 目的观察Claudin-6基因在食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织中的表达,探讨claudin-6基因与食管鳞状细胞癌发生及进展的关系。方法应用免疫组织化学法及原位杂交法检测claudin-6及其mRNA在食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织中的表达。结果在正常食管上皮组织及食管鳞状细胞癌中,claudin-6及mRNA的阳性表达率分别为25.0%、64.3%及25.0%、69.0%,组间阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=5.834,P0.05),但与肿瘤组织分化程度相关(P<0.05)。结论Claudin-6基因在食管鳞状细胞癌组织中呈高表达,提示claudin-6表达上调与食管鳞状细胞癌的发生和分化密切相关。

摘要： 【目的】利用FISH技术追踪三倍体‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂过程特定染色体的行为,明确其配对和分离规律,丰富对杨树异源三倍体减数分裂过程染色体行为的细胞遗传学认识。【方法】以三倍体‘银中杨’花药为材料,对不同酶液组合和酶解时间进行筛选,在此基础上均进行减数分裂染色体制片,以45S rDNA序列为探针,利用FISH技术,对‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂过程染色体行为进行追踪和分析。【结果】1)筛选出适于‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂染色体制片的酶解条件为3%纤维素酶+1%果胶酶混合液在37°C下酶解3 h,结合压片和冷冻脱盖片,可获得细胞分散度良好,细胞质薄,背景干净,染色体形态清晰的制片,适用于FISH分析。2)45S rDNA探针信号定位于‘银中杨’3条同源染色体上,它们在中期I呈现III、II+I、I+I+I 3种配对形式,其中三价体发生的频率最高,达69.28%,II+I和I+I+I的配对类型分别占28.10%和2.61%,表明信号所定位的染色体亲缘关系可能较近,但也存在联会松弛的现象。3)约80.37%~93.44%的细胞在后期I至中期II发育阶段呈现2/1分离模式,约63.00%~73.08%的细胞在后期II至末期II呈现2/2/1/1分离模式,表明探针信号所定位的染色体在大部分细胞中遵循较为正常的分离规律,但在部分细胞中也观察到探针信号所对应的1~2条染色体在后期I、中期II、后期II、末期II发生分离滞后或形成微核,进而可能在后续发育过程丢失的现象。4)末期II细胞存在一定比例的融合核,其中可观察到3~4个45S rDNA探针信号,可能形成具有2n甚至超数染色体的配子。【结论】利用FISH技术可对杨树减数分裂过程的特定染色体行为进行定位和精细分析,尽管三倍体‘银中杨’全染色体组的减数分裂过程染色体行为异常紊乱,但45S rDNA探针所定位的染色体行为相对稳定,丰富了杨树异源三倍体减数分裂染色体行为的认识。

摘要： 自20世纪80年代以来,随着人们对于基因组研究的不断深入,细胞分子检测技术飞速发展,首例由于染色体微缺失或微重复导致的病例被医学界发现,引起了科研人员的广泛重视。近年来,精准医学全面兴起,微缺失和微重复检测工作的临床意义越发受到医务工作者的重视,这对临床检验人员基本素质提出了较高要求,其不但需要对疾病相关知识具有一定储备量,还需要熟悉其相关检测技术的优点及局限性,从而在进行检测时选择合适的检测技术,最大程度提升该技术的临床推广价值。

摘要： 神经营养因子酪氨酸受体激酶(NTRK)基因融合于1986年在结直肠癌中首次被发现,这种致癌的NTRK基因融合已经被发现存在于多种不同组织学类型的成人和儿童肿瘤中。NTRK基因融合为靶向治疗提供了新的靶点,目前针对该种基因突变的不限年龄、不限肿瘤类型的广谱抗癌药Larotrectinib和Enrectinib也已经在美国、日本、欧洲地区批准上市。本文将从原肌球蛋白受体激酶(TRK)蛋白的生理与功能、NTRK基因融合与肿瘤发生、NTRK基因融合的检测、NTRK基因融合的靶向治疗4个方面进行梳理阐述。

摘要： 【目的】研究感染鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)镜鲤的组织病理特征及CEV在各组织中的分布规律,以期为鲤浮肿病的诊断和防控提供参考。【方法】利用HE染色观察发病镜鲤心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑、鳃组织的病理变化情况;用免疫组织化学法检测CEV在镜鲤各组织的分布和蛋白表达情况;利用CEV P4a基因保守区域设计3条探针,于5′-端标记FAM进行原位杂交,检测CEV在镜鲤各组织的核酸分布情况;实时荧光定量PCR检测感染镜鲤各组织的病毒载量。【结果】HE染色观察发现,患病镜鲤的鳃丝肿胀、充血,鳃丝间有脱落堆积的红细胞和炎性细胞,肝脏细胞深染萎缩,胆小管出血,脾脏组织出现明显间隙并伴有出血,肾脏组织充血明显,肾小管有明显闭合现象。免疫组织化学结果显示,在患病鱼的鳃和肝脏组织中大量表达CEV P4a蛋白,在其他组织中也有少量表达。原位杂交结果显示,CEV核酸大量存在于鳃组织中,在心脏、脾脏和肾脏中均有少量阳性信号。实时荧光定量PCR结果显示,鳃组织病毒载量极显著高于心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑组织(P<0.01)。【结论】感染CEV后,镜鲤内脏组织出现不同程度充血、出血,病毒主要分布在鳃,说明鳃是CEV增殖的最主要靶器官。

摘要： 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长具有明显的性别二态性,性成熟雌鱼体重显著高于雄鱼。鱼体肌肉占体重的40%~60%,肌肉生长是生长性状的核心,而myostatin(mstn)基因是肌肉生长发育的负调控因子,对成肌细胞的增殖具有抑制作用。本研究旨在探究肌肉生长发育过程中,mstn基因在半滑舌鳎雌、雄鱼的时空表达模式及其与雌、雄鱼生长差异的关系。结果显示,在所检测的1龄鱼的9个组织中,mstn在肌肉中的表达量最高。不同发育时期的肌肉组织定量结果显示,1龄和2龄雄鱼中的表达量显著高于雌鱼(P<0.05),而在选取的其他时期,雌、雄鱼之间的表达量不存在显著差异。原位杂交结果显示,mstn基因的表达位置在肌纤维边缘,即成肌细胞增殖分化的位置。本文系统研究了肌肉生长发育的负调控因子mstn在半滑舌鳎雌、雄鱼中的时空表达模式,为深入研究半滑舌鳎雌、雄鱼生长差异的原因及其机制提供了基础。

摘要： 目的在单张淋巴瘤石蜡切片上建立循环荧光原位杂交检测的方法,为需要多基因检测的淋巴瘤患者在组织或切片不足的情况下提供及时有效的诊断。方法回顾性收集2020年1月至2021年5月首都医科大学附属北京友谊医院病理科(北京市临床医学研究所淋巴瘤诊断研究中心)和外院会诊的淋巴瘤病例共27例,其中本院10例,外院会诊17例。27例均进行过MYC、BCL2和BCL63种基因的FISH检测,每例切片3张。根据杂交的不同将实验分为3组:杂交1组(HG1):将3张切片分别滴加MYC、BCL2、BCL6探针并按我科室常规荧光原位杂交方法操作。杂交2组(HG2):将HG1组中杂交MYC探针的切片使用本文介绍的循环荧光原位杂交方法,滴加BCL2探针进行第2次杂交。杂交3组(HG3):将HG2组的切片用循环方法滴加BCL6探针进行第3次杂交。观察3组切片红、绿荧光信号的有无、信号模式及组织、细胞结构情况。结果HG2组和HG3组循环荧光原位杂交的成功率均为100%。循环杂交后,HG2组中BCL2基因和HG3组中BCL6基因断裂阳性、阴性及扩增病例与HG1组完全相符,每张切片上基因表达异常的细胞数目与HG1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HG2组和HG3组在循环杂交后,切片上的组织结构完整,细胞轮廓清晰,信号明亮清晰、定位准确。结论循环荧光原位杂交检测法可以在同一张切片上多次杂交不同的基因探针,方法简便,成功率高,结果准确,可有效解决淋巴瘤患者因组织或切片不足而无法进行多基因检测的问题,在淋巴瘤诊断中具有实用价值。

摘要： Foxl2是叉头状转录因子(forkhead transcription factor,Fox)基因家族的重要成员之一,在卵巢发育和性别调控中发挥着重要作用。为探究Foxl2在虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)性腺发育中的表达调控模式,利用生物信息学方法分析了虾夷扇贝Foxl2的序列特征;采用半定量PCR(RT-PCR)检测了Foxl2在不同组织中的表达差异。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和原位杂交技术(ISH)揭示了Foxl2在性腺发育4个时期(增殖期、生长期、成熟期和排放期)的时空表达变化。结果显示,虾夷扇贝Foxl2序列包含Fox基因家族共有的FH结构域;多重序列比较分析显示,虾夷扇贝与栉孔扇贝(Chlamys farreri)、欧洲大扇贝(Pecten maximus)的相似性最高,分别为98%、96%。系统进化树分析显示,在不同物种以及进化的过程中,Foxl2基因具有较高的保守性。定量分析和原位杂交结果显示,原位杂交阳性信号主要定位在生殖细胞的细胞质中。在虾夷扇贝的鳃、肾、肝胰腺、精巢中,都可检测到少量Foxl2转录本的存在,在卵巢中表达量最高,且在卵巢成熟期达到最高值。随着性腺发育和精细胞的逐级分化,Foxl2的表达量呈下降趋势,这与原位杂交的结果一致。研究表明,Foxl2在虾夷扇贝卵巢发育中可能发挥重要作用,推测其是雌性虾夷扇贝性腺发育调控中的关键基因,可为今后阐明其在虾夷扇贝性别分化进程中的功能提供理论依据。

摘要： 目的 探讨EB病毒(EBV)感染与胃癌临床病理特征的相关性。方法 收集2018年6月至2019年5月安徽省肿瘤医院根治性手术切除的胃癌石蜡包埋样本127例,采用全自动原位杂交方法检测EBV编码的小RNA(EBER)的表达,分析EBER表达与临床病理特征的相关性。结果 EBER阳性13例(10.2%)。不同性别、年龄、肿块直径、肿块部位、TNM分期、淋巴结转移数之间EBER阳性率差异均无统计学意义(P>0.05),不同lauren分型EBER表达差异有统计学意义(χ^(2)=6.290,P<0.05),其中混合性阳性率最高,伴EBER表达的肿瘤间质常伴多量淋巴细胞浸润。结论 EBER原位杂交检测有助于对胃癌EBV感染的筛查,通过增加对EBV相关性胃癌(EBVaGC)临床病理特征的认识,从而为临床对该类肿瘤的诊疗提供更多的病理学依据。

摘要： 目的探讨野生型斑马鱼白细胞介素10(IL-10)在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法在美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置,与Ensemble数据库中的数据进行比对,采用软件分子进化遗传分析软件(MEGA X)绘制系统进化树;收集3组72受精后小时(hpf)斑马鱼胚胎、30枚/组,提取总RNA(Total RNA)及合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),构建斑马鱼重组质粒pCS^(2+)-IL-10,体外转录合成地高辛标记的IL-10反义RNA探针;分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf的斑马鱼胚胎75枚(25枚/组、3组),采用全胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎不同发育时间点IL-10表达及分布情况。结果野生型斑马鱼IL-10基因与人类IL-10基因相似度较高,且在进化过程中相对保守;限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示,重组质粒构建无误;全胚胎原位杂交结果显示,4~12 hpf野生型斑马鱼胚胎中未观察到阳性杂交信号,18 hpf野生型斑马鱼胚胎中后部中间细胞群观察到IL-10阳性杂交信号,24~72 hpf野生型斑马鱼胚胎胚胎头部区域IL-10广泛表达,头部背侧、心脏、眼眶以及卵黄囊背侧部位的信号尤为明显。结论斑马鱼IL-10在进化过程中具有相对保守性,在早期胚胎发育过程中IL-10有不同程度的表达,提示IL-10在斑马鱼胚胎早期发育中发挥重要作用。

摘要： 目的:探讨细胞周期素E(cyclin E)在皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义.方法:采用原位杂交方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织血管内皮细胞的cyclinEmRNA表达水平,利用图像分析技术检测不同时期血管瘤和正常皮肤组织的阳性面积率和平均光密度.结果:增生期血管瘤内皮细胞cyclin EmRNA表达水平明显高于退化期及正常皮肤组织,差异有显著性意义(P＜0.01);退化期与正常皮肤组织血管内皮细胞cyclinEmRNA表达水平差异无显著性意义(P＞0.05).结论:细胞周期素E在血管瘤的发生中起了重要的作用.

摘要： 原位杂交技术是近年来快速发展起来的一门新技术,本文介绍了原位杂交技术的基本原理、特点及该技术与其他生物技术相结合而形成的一些新技术及其发展前景,综述了原位杂交技术在果树研究中的应用情况.包括：rDNA定位研究，病毒检测鉴定研究，鉴别种间和种内染色体间的差异，花器官分化因子的鉴定，鉴别基因组的同源性，探讨种的起源和种间亲缘关系。原位杂交技术是现代生物技术的重要组成部分，与其他生物技术一样，原位杂交技术在其发展与应用过程中也会出现一些问题，但随着原位杂交技术的不断改进和完善，相信在不久的将来原位杂交技术会被更广泛地应用于各个学科，并不断为生命科学提供新的资料、开拓新的领域。

摘要： 在查阅大量文献的基础上，本文以转p5CS基因冰草植株自交代（T0、T1、T2代）植株为材料，利用原位杂交技术对已转入的目的基因在染色体的位置进行确定，并通过原位杂交技术确定目的基因在染色体上遗传的稳定性。

摘要： 结合实际工作，对原位杂交和免疫组化方法检测EB病毒的效果进行了比较。结果显示，与LMP1的表达相比，EBER敏感性高，特异性好，阳性细胞数目多，检出率高(43.8%与25%)。进一步证实分子水平检测EBV明显优于蛋白水平。在实际工作的应用中，具有明显的优势，同时指出成本较高，相关设备要求较高的不足之处。

摘要： THE UNMET NEED-IN SITU RNAANALYSIS IHC and FISH are the leading tools for research&tissue diagnostics No sensitive and robust technology for in situ RNA detection yet UNDERSTANDING TUMOR MICROENVIRONMENT Visualizing expression of stromal genes that are associated with cancer progression RNA scope(R)IN SITU HYBRIDIZATION A specific and sensitive method to detect RNA biomarkers cells and tissues with morphological contest SIMPLE WORKFLOW LIKE IHCRNASCO)PE。

摘要： 目的：检测分泌性免疫球蛋白A在自发性感染肺炎链球菌猕猴胃肠道以及肝脏、食管的表达变化,探讨其在肺炎链球菌发病机制中的作用以及自发性肺炎链球菌性肺炎的病理特点.方法：本实验采用免疫组织化学和原位杂交方法检测分泌性免疫球蛋白A在食管、空肠、盲肠、胃以及肝脏的表达,通过测定光密度值和表达面积来比较感染前后的分泌变化.免疫组化结果显示,和健康组比较,分泌性免疫球蛋白A在感染组的光密度值以及表达面积在各组织均有下降趋势,其中在空肠阳性细胞表达面积有显著性下降(P＜0.05)；原位杂交结果和免疫组化结果基本一致,感染组各组织阳性细胞表达面积均比健康组减少,其中空肠、盲肠以及胃组织达显著性差异(P＜0.05),感染组光密度值较健康组高,但差异均不显著(P＞0.05).结果：阳性细胞的分布多集中于各胃肠段和食管的粘膜层,血管中可见较多阳性细胞,而肝脏中阳性细胞多呈散在分布.本实验中阳性细胞主要包括胃肠道粘膜层的淋巴细胞和肝细胞、血管内细胞以及炎性浸润细胞,部分腺体细胞、上皮细胞和食管粘膜层未角化上皮细胞也有阳性反应.结论：分泌性免疫球蛋白A可通过以体液免疫为主的免疫机制来帮助机体清除肺炎链球菌；分泌性免疫球蛋白A作为粘膜免疫系统中重要的抗体分子在感染组组织中表达水平的降低可能是导致肺炎链球菌入侵机体从而引起感染的一个因素.

摘要： 由于缺乏合适的标记物,Cajal间质细胞在禽类肠道的分布未见资料报道,本试验在第三章对鸡肠道ICC超微结构鉴定的基础上,应用合成的三相探针通过原位杂交方法,检测ICC的标记物c-kit mRNA在鸡肠道不同区域的分布规律；同时,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别对不同肠段粘膜组织和去粘膜肠壁组织的c-kit mRNA表达进行测定.原位杂交结果显示出两种类型的c-kit mRNA阳性细胞.第一种为纺锤形或星极细胞组成,主要位于内环形肌和外纵形肌之间的肌间层,粘膜下层、环形肌和纵形肌内也有发现.这种类型的细胞被界定为ICC.进一步根据此类细胞分布位置不同可分为肌间ICC、肌内ICC和粘膜下ICC三种,而且不同肠段内阳性细胞数目也不相同.第二种为圆形或颗粒型细胞组成,主要位于粘膜固有层内,粘膜下层也有少量发现,这类细胞被界定为肥大细胞,主要分布于回肠和空肠.RT-PCR结果显示在不同肠段均有c-kit mRNA的表达:在去粘膜肠壁组织中,回肠和结肠表达最高,空肠和十二指肠次之,盲肠最低；而在粘膜组织中,空肠表达最高,十二指肠和回肠其次,结肠和盲肠最低.实验结果揭示了鸡肠道ICC的分布模式,显示了鸡肠道不同部位中c-kitmRNA表达差异,这种差异可能与不同肠段的功能及其调节方式有关.

摘要： 为了获得百合花发育相关基因LLTCP1在调控百合花发育过程中的重要信息,本研究以麝香百合未开放的花蕾和幼嫩茎段为试验材料,以LLTCP1基因的全长序列为探针,应用RNA原位杂交技术,对LLTCP1基因在百合花发育各个阶段的时空表达动态进行了研究.结果表明,LLTCP1基因在外轮花被、内轮花被、雄蕊和心皮四轮花器官中均有表达,且表达强度随不同的发育阶段而变化.但幼嫩茎段中没有明显的LLTCP1基因表达.在长0.2cm和0.5cm的花蕾中,LLTCP1基因的表达量明显高于1.0cm和2.0cm的花蕾,说明随着花器官的发育成熟,该基因在各轮花器官中的表达水平逐渐降低.

摘要： 检测猕猴自发性感染肺炎链球菌后，白细胞介素6在胃肠道以及肝脏、食管的表达变化，探讨肺炎链球菌的发病机制以及自发性肺炎链球菌性肺炎的病理特点.采用常规H.E.染色观察消化系统病理组织学变化，采用免疫组织化学和原位杂交方法检测白细胞介素6在肝脏、食管、空肠、盲肠和胃组织的表达变化.各组织表现出典型的炎症病变，肝组织和肠腺均可见大面积坏死，在空肠、盲肠和肝脏中有明显的广泛性出血和充血现象： 肠道有大量炎性细胞浸润。和健康组比较，白细胞介素6在感染组的胃肠道以及肝脏、食管中的表达均呈现升高趋势，感染组的IL-6阳性细胞总面积比正常组有显著性升高(p<0.05)。在胃肠道以及食管的表达主要集中在黏膜层，在肝脏相对集中分布于血管周围。阳性细胞包括了部分腺体细胞、肝细胞、内皮细胞、未角化上皮细胞以及淋巴细胞。结论：白细胞介素6作为—种炎症细胞因子在肺炎链球菌感染中发挥了一定的作用，可能参与了肺炎的病理过程并对机体清除肺炎链球菌有一定促进作用.

摘要： 本论文克隆了大菱鲆胃蛋白酶原A和胃蛋白酶原C全长cDNA,并分析了其分子结构特征及表达部位.研究发现,大菱鲆PGA cDNA全长1307bp,编码377个氨基酸,PGC cDNA全长1430bp,编码385个氨基酸.通过功能分析发现，PGA较PGC的适应性更强，而PGC的保守性更强。大菱鲆PGA及PGC不仅在胃的粘膜层有表达，首次发现了其在粘膜下层也有表达。另外，通过RT-PCR分析表明，PGA及PGC不仅在消化器官中表达，在卵巢及肌肉组织中也有微量的表达。

摘要： 本发明涉及一种用于原位杂交的杂交液、其制备方法及原位杂交检测试剂盒。该用于原位杂交的杂交液，包括以下终浓度的组分：体积百分浓度不超过2％的甲酰胺、重量体积百分浓度为0.1‑10％的氟化物、2‑4倍浓度的SSC、1‑10mM的EDTA、1‑5倍浓度的Denhardts溶液、重量体积百分浓度为5‑10％的硫酸葡聚糖、0.1‑1mg/mL的鲑鱼精DNA、以及50‑100mM且pH为7.0的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液或Tris‑HCl缓冲液。本发明的用于原位杂交的杂交液可在保证杂交信号的情况下，提高杂交效率，缩短杂交时间。

摘要： 本发明公开了一种不依赖荧光检测杂交信号的鱼类染色体原位杂交液，由去离子甲酰胺，2xSSC缓冲液,聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯,酵母总RNA，封闭试剂，乙二胺四乙酸,硫酸葡聚糖，柠檬酸三钠，磷酸氢二钠,焦碳酸二乙酯处理后的水，变性后的探针与去离子甲酰胺混合液按一定比例配置成的。应用本发明的杂交液可以使染色体原位杂交技术不依赖于荧光检测，使用普通显微镜就可以观察到荧光信号,而且试剂配制和存放便捷，杂交结果观察、拍照方便，杂交材料可以长期存放，实验过程更加简单易于操作，极大的扩大了鱼类染色体原位杂交的应用范围。

摘要： 本发明涉及一种促进荧光原位杂交的组合物及杂交液，荧光原位杂交探针工作液、荧光原位杂交方法，属于分子病理诊断技术领域。本发明中的促进荧光原位杂交的组合物，添加了异硫氰酸胍，异硫氰酸胍能够促进探针中的DNA与样本中的DNA进行结合，提高杂交效率；因此探针工作液能够实现快速杂交、短时杂交。由该组合物制成杂交液，并调整了传统组分氯化钠、柠檬酸钠、甲酰胺、硫酸葡聚糖的浓度；得到的杂交液在3h内即可完成杂交，并且杂交后仍然具有信号亮度强并且特异性好的特点。

摘要： 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及一种荧光原位杂交芯片及荧光原位杂交方法。包括：支撑衬底和功能结构层；功能结构层设置在支撑衬底上；功能结构层具有腔体结构；腔体结构包括分离区和捕获区；分离区中设置有确定性侧向位移阵列；捕获区与分离区通过连接通道连通；捕获区中设置有捕获阵列；功能结构层中还设置有反应试剂进样通道，反应试剂进样通道与捕获区连通。通过确定性侧向位移阵列将外周血中稀少的肿瘤细胞进行富集分离，并通过捕获阵列实现了对肿瘤细胞的捕获固定。肿瘤细胞可以在捕获区中进行荧光原位杂交，从而实现了直接在荧光原位杂交芯片上进行一体化的肿瘤细胞富集及荧光原位杂交检测，简化了检测过程，省时省力。

摘要： 本发明公开了一种动力相关蛋白1(dynamin‑related protein 1，drp1)基因用于荧光原位杂交的引物及其cRNA原位杂交的探针的制备方法，按照如下步骤：(1)根据drp1基因的Gene bank序列，我们设计了3对drp1的特异引物，并且分别对此引物扩增出drp1基因对应的序列，作为drp1蛋白特异的探针序列；(2)构建drp1的cRNA原位杂交的探针质粒；将探针质粒转化细菌后，细菌培养后进行测序；(3)制备drp1的cRNA原位杂交探针；(4)检测drp1的cRNA探针的原位杂交。

摘要： 本发明属于分子杂交检测技术领域，具体涉及一种适用于细菌FISH检测的杂交缓冲液体系及其原位杂交方法。所述杂交缓冲液中各组分的配比为：15％去离子甲酰胺、2×SSC、0.5M EDTA、5×Denhardt、50mMNaH

摘要： 本发明涉及一种用于原位杂交的杂交液、其制备方法及原位杂交检测试剂盒。该用于原位杂交的杂交液，包括以下终浓度的组分：体积百分浓度不超过2％的甲酰胺、重量体积百分浓度为0.1‑10％的氟化物、2‑4倍浓度的SSC、1‑10mM的EDTA、1‑5倍浓度的Denhardts溶液、重量体积百分浓度为5‑10％的硫酸葡聚糖、0.1‑1mg/mL的鲑鱼精DNA、以及50‑100mM且pH为7.0的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液或Tris‑HCl缓冲液。本发明的用于原位杂交的杂交液可在保证杂交信号的情况下，提高杂交效率，缩短杂交时间。

摘要： 本实用新型公开了一种用于荧光原位杂交的简易杂交装置，包括固定基板，所述固定基板的上端安装有固定杆，固定杆的外部表面活动套接有升降套管，升降套管与固定杆之间通过紧固螺栓相固定，所述固定基板上安装有电动机，电动机的输出端通过电动推杆固定连接有实验台板，电动推杆与电动机输出端之间安装有转盘，所述实验台板的内部分别是由导热面层、加热夹层和隔热板所共同组成，导热面层包覆在加热夹层的上表面，隔热板包覆在加热夹层的下表面，加热夹层的内部安装有电加热丝网。本实用新型通过安装有可旋转升降式实验台板，方便对载玻片上微生物进行荧光标记和操作试验，同时可对实验台板进行微加热，用来观察微生物杂交后的活性状态。

摘要： 本实用新型公开了用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括凹槽、连接轴、加样孔、玻片槽、固定盒、插孔、盖片、盖板、密封胶条、连接杆、挡板、限位块、弹簧、矩形槽、卡块和插杆，所述盖片的外侧固定设有连接轴，连接轴相对一侧的盖片上设有固定盒，固定盒两侧的侧壁上开设有插孔，盖片两侧面的边缘位置设有凹槽，盖片上设有若玻片槽，每个玻片槽上都设有加样孔，盖片的两侧分别设有盖板，盖板的一端设置在连接轴上，盖板的另一端设有插杆，两个盖板相对盖片一侧的侧面边缘位置均设有密封胶条，固定盒的内部开设有矩形槽，矩形槽的内部设有限位块，限位块的两端分别设有卡块。

摘要： 本实用新型公开了一种用于原位杂交的简易杂交装置，包括操作台、冷藏室、抽屉、置物架、试剂储藏箱、烘箱、储液试管、橡皮塞、进气管、打气筒、活塞、出液管和取液口，所述操作台为长方体实验桌，顶面设有台面，台面下方设有冷藏室和烘箱，所述冷藏室由制冷设备、保温层和抽屉组成，所述抽屉滑动连接在冷藏室的侧壁上，抽屉内设有置物架和试剂储藏箱，所述试剂储藏箱为长方体箱体，由箱盖、试管架和箱体组成，试剂储藏箱箱盖上固定连接有多个打气筒和取液口，并设有通孔，箱盖的通孔中固定连接有进气管和出液管，进气管和出液管的顶部固定连接在打气筒和取液口的底部中心处，试剂架上设有多个通孔，通孔中固定连接有储液试管。