HBx蛋白对IGF-II基因P4启动子活性的影响

汤绍辉; 曲春晖; 杨敏英; 罗羽宏; 杨冬华

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HBx蛋白对IGF-II基因P4启动子活性的影响

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目的: 构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达载体pEYFP-C1-X及人IGF-II基因P4启动子调控的荧光素酶报告载体pGL3-P4,并初步探讨HBx对IGF-II基因P4启动子活性的影响.方法:应用基因重组技术,将HBx基因及P4启动子分别克隆入pEYFP-C1及pGL3-Basic载体,构建重组质粒pEYFP-C1-X及pGL3-P4;将pEYFP-C1-X稳定转染HepG2细胞,进行G418筛选;将体外甲基化pGL3-P4瞬时转染HepG2-EYFP-X细胞,采用双荧光素酶实验检测P4启动子的转录调控活性.结果:(1)经酶切及测序鉴定,重组质粒中的目的片段HBx和P4启动子的大小分别为465 bp及1 246 bp,序列与GenBank数据库一致.(2)获得了表达HBx的细胞系HepG2-EYFP-X,在荧光显微镜下呈现黄绿色荧光.(3)转染HepG2-EYFP-X细胞的甲基化P4启动子的荧光素酶活性明显高于其对照细胞HepG2-EYFP(P<0.01).结论: HBx可增加P4启动子的转录活性.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2010年第1期|7-11|共5页
作者
汤绍辉; 曲春晖; 杨敏英; 罗羽宏; 杨冬华;
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作者单位

暨南大学附属第一医院消化科,广东,广州,510630;

暨南大学附属第一医院消化科,广东,广州,510630;

暨南大学附属第一医院消化科,广东,广州,510630;

暨南大学附属第一医院普通外科,广东,广州,510630;

暨南大学附属第一医院消化科,广东,广州,510630;

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正文语种 chi
中图分类消化系肿瘤;
关键词
乙型肝炎病毒X蛋白; P4启动子; 转录活性;

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