转录活性

摘要： CsBLH7与CsKNAT4分别属于BELL类蛋白与KNOX类蛋白,可能与植物器官形态建成密切相关,但目前几乎没有关于CsBLH7与CsKNAT4蛋白互作的深入研究报道。采用酵母双杂交初步确定CsBLH7与CsKNAT4能够在细胞体内互作,形成BLH7-KNAT4蛋白复合物。双分子荧光互补(BiFC)进一步确定了这种互作关系。原生质体瞬时转染试验结果表明,CsBLH7与CsKNAT4分别为转录抑制因子与转录激活因子。同时,针对35S:CsBLH7、35S:CsKNAT4材料的形态分析结果表明,下胚轴细胞长度分别缩短与伸长,这与它们的转录活性相适应。再者,35S:CsBLH7、35S:CsKNAT4遗传材料的赤霉素合成酶基因分别下调与上调。研究结果表明,BLH7-KNAT4可能是通过调节赤霉素合成来调控下胚轴细胞长度,对揭示CsBLH7和CsKNAT4调控植物形态建成分子机理具有重要意义。

摘要： 背景与目的低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 2α,HIF2α)活性增高常见于肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的进展过程。HIF2α在ccRCC中的功能和作用机制仍不清楚。本研究阐释了连结桥粒斑珠蛋白(junction plakoglobin,JUP)和HIF2α在ccRCC中的作用。方法采用亲和纯化联合质谱(affinity purification and mass spectrometry,AP-MS)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)沉降和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法筛选和鉴定出可与HIF2α相互作用的蛋白质。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting法检测人ccRCC样本中JUP的表达情况。采用荧光素酶报告基因、染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)、环己酰亚胺追踪实验、泛素化检测研究JUP对HIF2α活性的调节。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测、集落形成实验、transwell迁移实验、异种移植瘤模型研究JUP敲减或过表达对肾癌细胞致瘤活性的影响。结果我们的研究发现,JUP是一种新的HIF2α结合蛋白,通过将VHL(von Hippel-Lindau,VHL)和组蛋白去乙酰化酶1/2(histone deacetylases 1/2,HDAC1/2)招募到HIF2α并调节其稳定性和转录活性来发挥重要作用。在体内和体外实验中,敲减JUP可促进肾细胞癌的致瘤活性;相反,JUP过表达则可抑制肾细胞癌的致瘤活性。另外,在ccRCC临床样本中JUP低表达,而且其低表达与低氧评分升高及预后更差相关。结论本研究表明JUP在ccRCC进展过程中通过调节HIF2α信号通路发挥重要作用,JUP可作为一个潜在的治疗靶点。

摘要： 脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)是脂肪水解过程中的主要限速酶,是调控细胞中甘油三酯和脂肪酸之间平衡的关键因子。为了分析奶山羊ATGL基因启动子的结构及转录调控机制,以奶山羊全血DNA为模板,通过PCR技术扩增出ATGL基因5′侧翼序列并进行生物信息学分析;构建了5个不同长度的启动子缺失片段报告基因载体,通过转染奶山羊乳腺上皮细胞并检测其活性,确定其核心区域;分别用PPARG激动剂罗格列酮和SREBP1激动剂T0901317处理细胞,检测其对ATGL启动子活性的影响。结果表明,克隆得到奶山羊ATGL基因5′侧翼序列2721 bp,包含转录起始位点上游2024 bp。经在线软件分析发现,ATGL启动子含有真核生物启动子元件TATA-box和CpG岛;对转录因子结合位点预测发现,其上含有FOXO、SREBF1、PPARG、C/EBPα和E2F1等结合位点。启动子活性分析结果表明,ATGL启动子核心区域位于转录起始位点上游-256—+1位,且在-527—-256位存在负调控元件。用罗格列酮和T0901317处理细胞后发现,二者均能显著上调ATGL启动子活性,且罗格列酮作用的区域为-527—-256位,T0901317在-882—-527位发挥作用,表明PPARG和SREBP1调控ATGL启动子活性。

摘要： [目的]本文旨在鉴定诱导细胞死亡DNA片段化因子α样效应因子A(CIDEA)基因上游调控区内与猪肌内脂肪沉积相关的单核苷酸多态性(SNP)位点,并分析关联位点对基因表达的影响,为解析CIDEA基因对猪肌内脂肪性状的影响机制提供参考。[方法]通过对猪CIDEA上游调控区2 kb片段测序,挖掘出肌内脂肪含量相关的候选SNP位点,在杜洛克×长白猪×大白猪群体中对候选位点进行关联分析;通过荧光定量PCR检测关联位点不同基因型个体的CIDEA基因表达量和肌内脂肪标记基因脂肪酸结合蛋白4基因(FABP4)、脂肪酸结合蛋白3基因(FABP3)的表达量;双荧光素酶报告基因系统分析突变位点对CIDEA基因转录活性的影响。[结果]猪CIDEA基因上游调控区包含6个SNP位点,连锁分析后选择g.97268816 T>A、g.97269217 G>A和g.97269353 C>T 3个标签SNP位点进行关联分析,发现g.97268816 T>A位点中AA基因型个体的肌内脂肪含量显著高于TT基因型个体(PA和g.97269353 C>T位点中3种基因型个体之间的肌内脂肪含量差异不显著(P>0.05)。g.97268816 T>A位点中AA基因型个体的CIDEA基因表达水平显著高于TT基因型个体(PA位点与猪的肌内脂肪含量显著相关,突变可以导致CIDEA基因的表达水平升高,进而影响猪的肌内脂肪含量。

摘要： 染色质重塑复合物能够通过与转录因子等多种蛋白质结合实现染色质重塑,在组织特异性表达、细胞核内信号传导、细胞分化、增殖等方面起重要作用。本文对近年来关于染色质重塑复合物家族构成、调控机制、主要方式、启动子区的特异性靶定以及以基因的转录激活或抑制作用等进行综述,以利于对基因调控、细胞因子应答、肿瘤发生、发育和分化等过程中表观遗传调控模式的深入研究。

摘要： 为了观察人SMAD4全长及剪接体在HEK-293T中的亚细胞定位,并分析它们在HEK-293T细胞中的转录活性差异,将SMAD4全长及剪接体的pEGFP-C1重组质粒转染至HEK-293T细胞中,在荧光显微镜下观察含GFP标签的SMAD4全长及其剪接体蛋白的亚细胞定位,并通过双荧光素报告酶实验在HEK-293T细胞中对SMAD4全长及其剪接体激活SBE报告基因的情况进行比较.亚细胞定位观察显示,与pEGFP-C1空载组中GFP在HEK-293T中呈现核质均匀分布不同,GFP-SMAD4和GFP-SMAD4△4、GFP-SMAD4△6、GFP-SMAD4△5-6、GFP-SMAD4△4-6、GFP-SMAD4△4-7五种剪接体均分布于 HEK-293T 的细胞质中;而GFP-SMAD4△3则主要分布于HEK-293T的细胞核中.双荧光素酶实验结果显示,与空载组相比,在6种剪接体过表达组中,只有SMAD4△3过表达组能对SBE报告基因的荧光素酶活性起到一定的上调作用;但与SMAD4△3过表达组比较,SMAD4全长过表达组能对SBE报告基因的荧光素酶活性起到更明显的上调作用.本文观察了人SMAD4全长及剪接体在HEK-293T中的亚细胞定位,并分析了其对下游信号通路的转录激活情况,可为后续SMAD4剪接体蛋白的功能研究提供一定的基础.

摘要： 采用RNAseq测序技术对比变异轴孔珊瑚(Acropora valida)在酸化高温胁迫及去胁迫条件下的mRNA转录组.构建了12个cDNA文库,共获得451789689个双端片段.通过拼接共得到1056727个转录本,其中86.5％匹配到珊瑚序列.转录本的差异表达分析显示,胁迫条件下共6328个转录本发生了显著变化,主要涉及热休克蛋白、物质转运蛋白、凋亡调节和钙化四个方面.其中98.1％的差异表达转录本在胁迫去除后都能恢复到对照组水平;结果表明,尽管变异轴孔珊瑚在酸化高温胁迫时受到很大影响,但其转录本表达在胁迫去除后能恢复到原来的水平.首次探究酸化高温双胁迫去除后变异轴孔珊瑚转录本表达水平的恢复潜力,对研究珊瑚如何应对全球气候变化有一定指导意义.

摘要： 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)能够将自身质粒上的部分DNA片段(简称T-DNA)以T-复合物的形式转运、整合至宿主基因组,而用作高效的植物转基因工具.vbp2是编码VBP蛋白的3个同源基因之一,VBP蛋白通过与T-复合物上的VirD2结合参与T-DNA的转运过程.根据生物信息学预测,vbp2基因的启动子区可能含有多个转录调控元件.通过同源重组的方法,将A.tumefaciens染色体上的vbp2基因替换成编码红色荧光蛋白的rfp基因,使vbp2的启动子控制rfp的表达,因此,可通过测定所表达的RFP的荧光强度来表征vbp2启动子的活性.结果表明:乙酰丁香酮(AS)和鼠李糖(Rha)均能诱导vbp2启动子表达RFP,AS和Rha的最佳诱导浓度分别为150μmol/L和100μmol/L.通过截短vbp2启动子DNA片段的方法,证明响应AS和Rha诱导的调控区域分别位于上游的165-260 bp和126-165 bp.

摘要： 目的:用热休克元件(HSE)8个重复序列修饰人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp),比较该调控元件在37°C及43°C下不同细胞株中的转录活性. 方法:设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERTp;将hTERTp与基因合成的8HSE片段,重组于双荧光素酶报告载体pGL4.2中,采用TurboFectTM Transfection Reagent,将重组质粒和内参质粒pGL4.74(含TK启动子)共转染于hTERT高表达的SW480细胞株和hTERT低表达的MKN28细胞株,双荧光素酶法检测hTERT启动子在37°C及43°C下的转录活性. 结果:PCR、酶切和DNA测序鉴定hTERTp、8HSE片段克隆成功,并鉴定荧光素酶报告基因载体pGL4.2-hTERTp和pGL4.2-8HSE-hTERTp构建成功,荧光素酶检测结果显示:hTERTp在SW480和MKN28中相对转录活性分别为28.44、7.80,差异具有统计学意义,8HSE-hTERTp在37°C(6.44)及43°C(327.34)转录活性差异有统计学意义(均P＜0.05). 结论:热诱导对hTERTp转录活性无明显影响,而热诱导对8HSE修饰的hTERTp转录活性有明显的增强作用,该调控元件具有肿瘤细胞表达的靶向性和特异性,在用于靶向性肿瘤基因治疗联合肿瘤热疗方面具有应用前景.

摘要： 目的:本课题以AR为切入点,从类泛素化修饰角度,研究环境污染物镉(Cadmium,Cd)致前列腺癌的可能机制.材料方法:选择CdCl2为研究对象,用AR表达阴性的人胚肾HEK293T细胞和AR表达阳性的前列腺癌LNCaP细胞分别就Cd对外源性和内源性AR转录活性的影响进行研究.用流式细胞技术分析Cd对细胞周期的影响;用双荧光素酶试验检测Cd对AR转录活性的影响;用Realtime PCR和Western blot方法检测Cd对AR及其下游正调控靶基因PSA以及SENPI的表达;用Co-IP方法检测Cd对AR类泛素化修饰水平的影响.结果:Cd可以通过增加受AR调控的周期相关基因的表达,促进前列腺细胞的增殖.荧光素酶试验和基因表达分析发现,发现Cd可增强AR的转录活性及其下游靶基因PSA的表达,但对AR本身的表达量无明显影响,这表明Cd过可能通过翻译后修饰影响AR的活性.鉴于此检测了Cd对可破坏AR类泛素化的特异性蛋白酶1mRNA和蛋白表达水平的变化,发现Cd增加SENP1的表达;将SENP1的表达敲降后,AR的转录活性及PSA的表达随之降低;进一步用Co-IP试验检测到Cd处理后AR的类泛素化水平降低.结论:以上结果表明,Cd通过上调去类泛素化酶SENP1,降低AR的类泛素化修饰水平,增强AR的转录活性,促进前列腺癌的发生.

摘要： 目的:本课题旨在研究黑色素瘤相关抗原MAGE-A亚家族中MAGE-A11对p53转录活性的影响,旨在了解MAGE-A11在肿瘤发生发展中的作用机制.方法:利用基因转染、荧光素酶报告基因分析、RT-PCR、Western-blot及克隆形成实验方法研究了人黑色素瘤抗原MAGE-A 11对p53转录活性的影响.结果:荧光素酶报告基因分析结果显示,单独转染p53质粒组的荧光素酶活性和空载体对照组相比显著增加(P＜0.05);共转染恒定量p53质粒和逐渐增加量(100ng、200ng、400ng)MAGE-A11质粒之后,各实验组的荧光素酶活性分别为48.90±4.77、60.11±2.66、51.47±4.52,与单独转染p53质粒组相比,明显增高(P＜0.05);单独转染400ng MAGE-A11质粒组的荧光素酶活性,与空载体对照组相比,没有明显变化(P＞0.05).此结果提示外源性MAGE-A11可增强p53的转录活性,但不存在剂量依赖性.RT-PCR和Western-blot结果显示,MAGE-A11对p21WAF1的表达均无影响.克隆形成实验结果显示,单独转染p53质粒组的细胞克隆数明显少于空载体对照组(P＜0.05);共转染p53和MAGE-A11质粒组的细胞克隆数明显少于单独转染p53质粒组(P＜0.05);单独转染MAGE-A11质粒组的细胞克隆数与只转染空载体质粒组相比,没有明显变化.这些结果提示MAGE-A11可增强p53的转录活性及由此引起的抑制细胞增殖的功能.结论:外源性MAGE-A11可促进p53的转录活性。

摘要： 本文结合理论计算方法和离体模型，运用分子对接模拟，雌激素激动/拮抗筛选预测法(AADS)，受体多态分析(RPA)和报告基因实验，探讨了8种辣椒素类似物的ER转录活性，并对比其在不同物种间的ER活性差异。分子对接和AADS结果表明葡聚糖凝胶(6-I-CPS )具有ER激动活性，而多巴胺(NADA)，古曲抑菌素A(TSA)，辣椒素，辣椒平和二氢辣椒素均表现出ER拮抗活性。然而，两个分子体积较大的化合物不能够进入ER的疏水空腔中。

摘要： 本研究检测了冬瓜皮粗提物(EWGP)对于防治高脂餐诱导C57BL/6肥胖小鼠代谢紊乱的疗效.在预防性实验中,EWGP抑制了高脂餐诱导小鼠的体重增长,并且显著降低了小鼠血清中的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量,以及小鼠肝脏中的甘油三脂和总胆固醇含量,此外EWGP显著改善了小鼠的空腹血糖.在治疗性研究中,将小鼠诱导成肥胖模型并用EWGP治疗两周.发现EWGP治疗降低了肥胖小鼠血清及肝脏中的甘油三脂含量,并明显改善了肥胖小鼠空腹血糖和葡萄糖耐量.受体分析和基因表达分析结果显示EWGP能抑制过氧化酶增殖体激活受体γ(PPARγ)转录活性,而且能降低PPARγ及其靶基因的mRNA水平.此外还发现EWGP下调了小鼠肝脏中羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)的表达.数据暗示EWGP能通过抑制PPARγ和HMGCR信号来降低高脂餐诱导C57BL/6小鼠血脂.

摘要： Geminin为细胞周期调控蛋白，其通过与Hox的相互作用抑制Hox蛋白的转录活性，及使Hox参与细胞增殖的调控。研究表明，Geminin与同系或旁系同源域的相互作用具有选择性，主要取决于同源域第三段螺旋结构上的氨基酸残基R43和M54及氮末端的碱性氨基酸群。该蛋白复合物结构第一次揭示了同源域与其调控蛋白质相结合的分子机制，并提供了一个同源域转录因子与其DNA竞争性的转录抑制蛋白之间相互作用的范例。

摘要： 本文旨在研究缺氧(1％O2)及模拟缺氧状态下,硫化氢(H2S)对于缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白表达和转录活性的影响,探讨H2S调节HIF-1α蛋白表达的分子机制及此相互作用对于细胞功能的影响。指出，H2S可明显下调缺氧及模拟缺氧条件下HIF-1α蛋白水平，该作用通过抑制HIF-1α蛋白翻译过程而非促进HIF-1α蛋白降解。H2S通过磷酸化eIF2α参与抑制缺氧状态下HIF-1α蛋白翻译。H2S通过缺氧状态下下调HIF-1α蛋白，介导靶基因VEGF表达下降，引起缺氧状态下血管内皮细胞体外血管生成活性降低。由于H2S在常氧状态下促进内皮细胞血管活性，提示H2S对于血管活性具有双向调节作用，而这种双向调节作用与氧水平密切相关。

摘要： 本实验采用121头郏县红牛的血样，进行Asp7GLy突变研究。实验综合表明Asp7GLy突变通过影响PPARg的转录活性，抑制了其诱导脂肪细胞分化的能力，这样的生物学影响进一步导致了其与较小的牛体尺指标相关联。提示PPARgAsp7Gly可以作为一个分子标记应用于牛的育种中，含有该突变的个体应提早淘汰，以提高整个群体的生产水平。

摘要： 目的:肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是与肝炎病毒(hepatitis B,HBV或hepatitis C virus,HCV)感染密切相关、血供丰富的高度恶性实体瘤.HCC手术切除仍是最好的治疗方法,但因其对放化疗不敏感,预后极差.胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factor-Ⅰ receptor,IGF-IR)是细胞表面酪氨酸蛋白激酶受体,编码它的基因位于15号染色体长臂2区6带3亚带(15q26.3),所介导的信号通路与HCC关系密切.近来发现,肝细胞恶性转变和癌变过程中IGF-IR异常活化,过表达的IGF-IR作为肝癌初期确诊的标志及肝癌靶向治疗的新靶点,具有应用前景.本文通过构建靶向IGF-IR短发夹型RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,探讨干预IGF-IR基因表达后对裸鼠肝癌形成的影响,为临床肝癌基因治疗提供有价值依据.rn 方法:以人IGF-IR基因序列构建并筛选最有效的IGF-IR-shRNA真核表达质粒,将其转染至PLC/PRF/5细胞,通过G418筛选出稳定株,移植瘤裸鼠皮下成瘤.根据体积均值绘制肿瘤生长曲线,H&E染色观察肿瘤组织学形态,免疫组化法检测瘤组织内IGF-IR表达.rn 结果:IGF-IR在人肝LO2细胞及肝癌PLC/PRF/5,HepG2和Bel-7404细胞呈差异表达,在PLC/PRF/5细胞中表达最高;4对构建IGF-IR-shRNA经筛选以shRNA4干扰效果最佳且具特异性;以特异性shRNA4干预IGF-IR能明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长;病理组织学检查(H&E染色)显示对照组肿瘤细胞异型性明显大于干预组;免疫组织化学染色证实干预组肿瘤组织IGF-IR表达明显低于对照组.rn 结论:干预IGF-IR基因转录有效抑制裸鼠移植瘤生长,提示IGF-IR有望成为肝癌基因治疗的有效靶点.

摘要： 目的:肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是与肝炎病毒(hepatitis B,HBV或hepatitis C virus,HCV)感染密切相关、血供丰富的高度恶性实体瘤.HCC手术切除仍是最好的治疗方法,但因其对放化疗不敏感,预后极差.胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factor-Ⅰ receptor,IGF-IR)是细胞表面酪氨酸蛋白激酶受体,编码它的基因位于15号染色体长臂2区6带3亚带(15q26.3),所介导的信号通路与HCC关系密切.近来发现,肝细胞恶性转变和癌变过程中IGF-IR异常活化,过表达的IGF-IR作为肝癌初期确诊的标志及肝癌靶向治疗的新靶点,具有应用前景.本文通过构建靶向IGF-IR短发夹型RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,探讨干预IGF-IR基因表达后对裸鼠肝癌形成的影响,为临床肝癌基因治疗提供有价值依据.rn 方法:以人IGF-IR基因序列构建并筛选最有效的IGF-IR-shRNA真核表达质粒,将其转染至PLC/PRF/5细胞,通过G418筛选出稳定株,移植瘤裸鼠皮下成瘤.根据体积均值绘制肿瘤生长曲线,H&E染色观察肿瘤组织学形态,免疫组化法检测瘤组织内IGF-IR表达.rn 结果:IGF-IR在人肝LO2细胞及肝癌PLC/PRF/5,HepG2和Bel-7404细胞呈差异表达,在PLC/PRF/5细胞中表达最高;4对构建IGF-IR-shRNA经筛选以shRNA4干扰效果最佳且具特异性;以特异性shRNA4干预IGF-IR能明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长;病理组织学检查(H&E染色)显示对照组肿瘤细胞异型性明显大于干预组;免疫组织化学染色证实干预组肿瘤组织IGF-IR表达明显低于对照组.rn 结论:干预IGF-IR基因转录有效抑制裸鼠移植瘤生长,提示IGF-IR有望成为肝癌基因治疗的有效靶点.

摘要： 本发明公开了具有抑制转录因子的转录激活活性的多肽及其编码基因与应用。该多肽，是如下1)或2)的多肽：1)由序列表中SEQ ID №：2所示的氨基酸残基组成的多肽；2)序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或十几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抑制转录因子的转录激活活性的由SEQ ID №：2衍生的多肽。该多肽对研究具有转录激活功能的转录因子的生物学功能及通过抑制此类转录因子的激活活性达到改变转基因植物(含有具有转录激活活性的转录因子)表型具有重要意义。

摘要： 本发明具体涉及LENG8作为mRNA转录调控蛋白及线粒体活性调控蛋白的应用。mRNA的加工对于维持细胞和组织的动态平衡至关重要。但是，本领域对哺乳动物细胞如何精确调节上述过程仍然未知。本发明研究证实了LENG8是酵母mRNA加工因子Thp3的哺乳动物直系同源物；进一步的，LENG8与mRNA加工过程中的TREX复合物成分相关联，用于调控mRNA的输出。另外，LENG8优先与编码线粒体蛋白的mRNA结合，是维持线粒体结构和呼吸活动所必需的，其表达缺失会抑制mRNPs的出核，导致线粒体损伤及自噬因子增加。基于LENG8的上述作用，LENG8的相关调节剂有望应用于临床药物的开发。

摘要： 本申请涉及用于增强逆转录酶(RT)活性和/或减少RT被抑制剂(例如福尔马林、单宁酸和/或肝素)抑制的组合物和方法。在一些实施方式中，通过向包含聚合酶的反应混合物中添加谷氨酸钾、组氨酸盐酸盐一水化物、泊洛沙姆188或其任意组合，以减少RT抑制。在其他实施方式中，通过向反应混合物中添加聚乙烯磺酸钠盐(PVSA)来增强RT。本申请还提供了用于目标序列的逆转录及其增强的寡核苷酸引物。这些引物具有高GC含量或低GC含量。还提供了在具有RNA模板和RT的组合物中使用RT抑制减少剂或RT增强剂改进RT产量、RT敏感性或RT对各种化学品的耐受性的方法。

摘要： 本发明公开了具有抑制转录因子的转录激活活性的多肽及其编码基因与应用。该多肽，是如下1)或2)的多肽：1)由序列表中SEQ ID №：2所示的氨基酸残基组成的多肽；2)序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或十几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抑制转录因子的转录激活活性的由SEQ ID №：2衍生的多肽。该多肽对研究具有转录激活功能的转录因子的生物学功能及通过抑制此类转录因子的激活活性达到改变转基因植物(含有具有转录激活活性的转录因子)表型具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种调控卵泡膜表面OVR基因表达活性的转录因子及其应用，所述转录因子为C/EBPα，用于促进禽类卵巢卵泡OVR基因表达。本发明以卵泡膜表面卵黄前体物受体(OVR)基因启动子区转录因子结合位点为研究对象，通过预测启动子区转录因子结合位点、过表达和敲低以及脂质转运验证启动子区转录因子，最后筛选出调控OVR表达的转录因子，并能促进OVR基因表达。本发明通过探究OVR表达调控的转录因子，以及转录因子应用于OVR高效表达，促进卵泡快速发育，对研究OVR基因启动子区转录调控因子参与卵泡发育促进产蛋等的分子机制具有很好的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种PHA转录调控蛋白PhaQ作为表面活性剂的制备与应用，制备过程包括质粒构建、蛋白表达与纯化的步骤；并将制备的PHA转录调控蛋白PhaQ作为生物表面活性剂来应用。本发明的制备方法简单、设备成本低，且制备的PHA调控蛋白PhaQ对柴油、润滑油、植物油均有较好的乳化能力，且能形成相当稳定的乳化结构。

摘要： 本发明公开了一种分析微生物群落功能基因转录和翻译活性的方法，其包括：提取微生物群落的总DNA样本、总RNA样本和总蛋白质样本；对提取样本进行宏基因组测序、宏转录组测序、宏蛋白质学分析；利用宏基因组测序结果构建微生物群落功能基因编码蛋白质数据库；基于此蛋白质数据库和宏转录组测序产生的mRNA序列数据组来分析微生物群落功能基因转录活性；基于宏蛋白质学分析结果和此蛋白质数据库来分析微生物群落功能基因翻译活性。本发明构建了统一的微生物群落功能基因组蛋白质数据库，并根据此数据库分析群落功能基因转录与翻译的表达量，直接比较群落功能基因转录和翻译表达水平的差异，进而研究群落功能基因的转录后调控过程。

摘要： 本发明公开了一种细菌转录抑制剂抑制大肠杆菌体外转录活性的检测方法，包括：制备大肠杆菌体外转录pKK450‑DNA模板；以pKK3535质粒为模板，制备荧光分子信标M.B.；制备大肠杆菌体外转录体系，检测大肠杆菌转录抑制剂对体外转录抑制活性。与现有技术相比，本发明可以精确的检测细菌转录抑制剂的活性；另外，由于本发明中采用荧光酶标仪以及96孔板此类高效、快速的检测仪器，因此，可以高通量的检测大量待测样品，对转录抑制类药物的筛选有着重要的应用价值。在此方法基础上可以对抑菌物质的作用机制进行分析，以确定其对细菌转录的影响。

摘要： 本发明提供了一种ESRP1启动子报告基因转录活性可视化及在去甲基化抗癌药物筛选中的应用，本发明构建了ESRP1启动子报告基因载体如SEQ ID NO.3所示，将报告基因转染肿瘤细胞并建立稳定转染细胞株后，外源ESRP1基因启动子将整合至基因组，并与内源性启动子呈同步甲基化。当去甲基化类药物处理稳定转染细胞株后，因启动子去甲基化从而引起报告基因表达上调，荧光信号增强、细胞发光强度增加，因此可用于在体内外条件下监测DNA甲基化抑制剂抗癌药物作用效果。该报告基因可用于在活体小动物肿瘤模型中实时、无创地对抗癌药物疗效进行早期评价，为以DNA甲基化为靶点的抗癌药物筛选提供了一个强有力的工具。

摘要： 本发明公开了一种具有高转录活性的T7RNA聚合酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明对原始T7RNA聚合酶进行改造，构建得到的T7RNA聚合酶突变体相对于野生型T7RNA聚合酶，具有转录效率高、合成产量高、纯度高、特异性强、贮藏稳定性好等优点。适于将T7RNA聚合酶突变体制备成RNA转录试剂盒，用于RNA疫苗和药物、体外转录、基因编辑、病毒RNA探针检测等方面，具有广泛的应用前景。