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Xaf1调节TNFR信号转导而诱导细胞凋亡的机制研究

         

摘要

目的:利用基因开关调节的Xaf1-Saos诱导细胞株,检测Xaf1对TNFR信号转导通路的影响,探索Xaf1与TNF-α协同诱导细胞凋亡的机制.方法:以免疫印迹法和RT-PCR检测Xaf1对TNFR1表达的影响,细胞周期DNA含量流式细胞术检测NF-κB对Xaf1诱导细胞凋亡的影响,gel mobility shift assay检测NF-κB的DNA结合活性,luciferase活性检测法及RT-PCR检测NF-κB的转录活性,激酶分析法检测SAPK/JNK激酶的活性.结果:Xaf1不影响TNFR1蛋白及mRNA水平的表达,细胞内诱导活性的NF-κB可抑制Xaf1诱导的细胞凋亡,Xaf1的表达抑制TNF-α所介导的NF-κB的DNA结合活性和转录活性,也抑制了SAPK/JNK激酶的活性.结论:Xaf1对TNFR信号转导的抑制是Xaf1协同TNF-α诱导细胞凋亡的机制之一.

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