马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建

朱春辉; 汤艳东; 那雷; 付丽华; 王雪峰; 林跃智; 杜承; 周建华; 徐方

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马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建

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Viperin是一种细胞内抗病毒蛋白,可以被Ⅰ型干扰素、多聚I:C、脂多糖及多种病毒诱导表达,在细胞内主要定位在内质网和脂滴,具有广谱的抗病毒功能.为研究马Viperin (eViperin)在抗病毒感染中的作用,本研究应用RT-PCR从马巨噬细胞中扩增eViperin基因,并将其克隆于真核表达载体pDC315中构建重组质粒pDC-eViperin-Flag,将重组质粒转染293T细胞,western blot检测结果表明eViperin在293T细胞中正确表达.将该重组表达质粒与表达马传染性贫血病毒(EIAV)Gag前体蛋白(Gag precursor,Pr55gag)的表达质粒共转染293T细胞,转染48 h后western blot检测,结果显示实验组细胞培养上清中的Pr55gag含量显著低于空白对照组,表明eViperin具有抑制EIAV释放的作用.此外,将该重组表达质粒与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,进一步构建拯救出表达eViperin的重组腺病毒,为研究eViperin的抗病毒功能研究奠定了基础.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2014年第5期|346-349|共4页
作者
朱春辉; 汤艳东; 那雷; 付丽华; 王雪峰; 林跃智; 杜承; 周建华; 徐方;
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作者单位

宁夏医科大学基础医学院,宁夏银川750004;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

宁夏医科大学基础医学院,宁夏银川750004;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
Viperin; 马; 马传染性贫血病毒; 重组腺病毒;

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