法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的筛选及鉴定

王臣; 郭香玲; 李小康; 汪洋; 张春杰; 吴庭才; 李德元; 陈溥言

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为鉴定与具有免疫调节功能和抗肿瘤潜能的法氏囊活性五肽(BP5)特异性结合的多肽,本研究利用噬菌体展示技术,以BP5-BSA为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行4轮亲和筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,筛选出3个能够特异性与BP5结合的噬菌体阳性克隆.测序结果显示,其编码的12肽序列分别为:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)和MSSTLNGMLNSL(P7-12),其核心基序为TLNXM.通过人工合成P2-12、P6-12、P7-12多肽,并采用MTT法检测其对BP5抗肿瘤细胞增殖能力的影响,结果显示,P2-12和P7-12肽在0.2 μg/mL～20 μg/mL浓度下,P6-12肽在2μg/mL～20 μg/mL浓度下均能够抑制BP5抗小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞增殖作用,其中P2-12在20 μg/mL浓度下抑制作用最为显著(p＜0.01).此外,p53荧光素酶活性检测结果显示,这3种BP5结合肽在实验浓度下均能够下调BP5促p53基因转录的活性.以上结果表明,这3种BP5特异性结合肽具有下调BP5抗肿瘤活性.本研究为进一步研究BP5抗肿瘤细胞增殖作用的机制提供了相关的实验依据.

著录项

来源
《中国预防兽医学报》 |2014年第12期|966-970|共5页
作者
王臣; 郭香玲; 李小康; 汪洋; 张春杰; 吴庭才; 李德元; 陈溥言;
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作者单位

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳471003;

南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京210095;

南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京210095;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
法氏囊; 活性五肽; 噬菌体随机肽库; 抗肿瘤; 结合肽;

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