猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白与RACK1蛋白相互作用的研究

郭东伟; 尹曼曼; 张枫; 李江南; 黄丽; 余丽芸; 翁长江

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猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白与RACK1蛋白相互作用的研究

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NSP9, a RNA dependent RNA polymerase (RdRp) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) is a key viral replicase required for the viral genome replication, but the RdRp for virus replication in host cells is not fully understood. To screen the porcine proteins involved in PRRSV genomic replication, pre-transformed porcine alveolar macrophage expression library was screened using PRRSV NSP9 protein as "bait". Receptor of activated protein kinase Cl (RACK1) was identified as a potential interacting partner of PRRSV NSP9 protein. In addition, the interaction of the NSP9 and RACK1 was further confirmed by co-transformation in yeast, co-immunoprecipitation and colocalization experiment in HEK293 cells. These results demonstrated that the RACK1 was a host protein interacting with PRRSV NSP9, which was identified in this study. However, the mechanism of RACK1 regulating PRRSV genome replication is needed to be further studied.%猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)编码的非结构蛋白NSP9为参与病毒复制的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp),而宿主蛋白与RdRp相互作用参与病毒基因组的复制机理尚不明确.为筛选与RdRp相互作用的宿主蛋白,本研究以PPRSV NSP9蛋白为“诱饵”,利用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞cDNA酵母表达文库,筛选结果显示PRRSV NSP9蛋白与宿主蛋白RACK1具有相互作用关系.进一步经酵母共转化试验和免疫共沉淀试验验证RACK1和NSP9特异性结合,并共定位于细胞浆中.研究结果表明,宿主蛋白RACK1是PRRSV NSP9蛋白的一种新的相互作用蛋白,然而RACK1参与PRRSV复制的详细机理有待深入研究.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2013年第4期|259-262|共4页
作者
郭东伟; 尹曼曼; 张枫; 李江南; 黄丽; 余丽芸; 翁长江;
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作者单位

黑龙江八一农垦大学生命科学技术院,黑龙江大庆163319;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

黑龙江八一农垦大学生命科学技术院,黑龙江大庆163319;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒; 猪肺泡巨噬细胞表达文库; NSP9; RACK1蛋白; 蛋白相互作用;

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