共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因和猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒的构建及其在小鼠模型上的免疫原性分析

李宏宇; 孙元; 常天明; 贺番; 黄俊华; 仇华吉

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本研究旨在以复制缺陷型人5型腺病毒为载体,构建一株同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组腺病毒疫苗.首先利用重叠PCR将GP5和E2基因通过口蹄疲病毒(FMDV)2A序列连接,形成一个完整的ORF,并将其克隆到腺病毒穿梭载体中,通过细茵内同源重组构建共表达PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的重组腺病毒(rAdV-GP52AE2).间接免疫荧光试验和western blot检测证实2个外源基因均获得表达.在小鼠上进行的免疫效力评价结果显示,rAdV-GP52AE2免疫组针对CSFV的中和抗体滴度可达1:128,针对PRRSV的中和抗体滴度为1:16;在淋巴细胞增殖试验中,免疫组与阴性对照组在增殖指数上有显著差异,表明该重组腺病毒可以同时诱导抗PRRSV和CSFV的特异性体液免疫和细胞免疫.这些结果显示,利用具有自动剪切功能的FMDV 2A多肽构建的重组腺病毒有望开发成一种同时预防PRRS和CSF的新型载体疫苗.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2010年第3期|161-166|共6页
作者
李宏宇; 孙元; 常天明; 贺番; 黄俊华; 仇华吉;
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作者单位

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒; 猪瘟病毒; 重组腺病毒; 免疫原性;

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