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禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备

         

摘要

为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中.将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达.利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清.SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84 ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;ELISA效价达到1:105以上.该研究为REV的检测及env蛋白的深入研究奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2010年第10期|812-814|共3页
  • 作者单位

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    禽网状内皮组织增生症病毒; env基因; 原核表达; 纯化; 多克隆抗体;

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