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利用重组蛋白检测ETEC菌毛抗体的间接ELISA方法的建立

         

摘要

通过构建pQE-30 Xa+K99重组质粒获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)重组K99蛋白的高效表达,Western blot检测该重组蛋白具有很好的免疫原性.利用纯化的重组蛋白为抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最适包被浓度为0.7μg/孔,血清最佳稀释倍数为1:800,酶标二抗最佳稀释倍数为1:6 000,初步建立了检测牛血清中抗ETEC菌毛抗体的间接ELISA方法.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验证明,该方法具有良好的特异性和敏感性,重复性好.

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