禽腺联病毒全基因组的克隆及感染性病毒的拯救

王建业; 孙怀昌; 朱国强

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禽腺联病毒全基因组的克隆及感染性病毒的拯救

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为了克隆禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)全基因组用于构建基因转移载体研究,以鸡胚致死孤儿病毒(CELO)作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖,将AAAV约4.7 kb双链基因组DNA与pCR2.1载体连接,构建了含AAAV全基因组的重组质粒pAAAV并进行了测序.序列分析表明,AAAV YZ-1株的基因组为4 684 bp,两端具有141 bp的末端倒置重复序列和Rep蛋白结合位点特征序列,与GenBank中收录的AAAV DA-1株和VR-865株的核苷酸序列同源性分别为95.0%和92.2%.将pAAAV质粒转染CELO病毒感染的鸡胚肝细胞系,获得了感染性AAAV病毒粒子,结果证明克隆的AAAV基因组中存在与病毒复制和包装相关的正确关键序列,可用于重组AAAV载体的构建.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2007年第11期|825-829|共5页
作者
王建业; 孙怀昌; 朱国强;
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作者单位

扬州大学兽医学院,江苏,扬州,225009;

扬州大学兽医学院,江苏,扬州,225009;

扬州大学兽医学院,江苏,扬州,225009;

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正文语种 chi
中图分类基因的重组;家畜病毒学;
关键词
禽腺联病毒; 基因组克隆; 序列分析; 病毒拯救;

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