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猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫组化试验中的初步应用

         

摘要

为制备猪圆环病毒3型(PCV3) Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白.以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤细胞株.Western blot与IFA试验结果显示,8株MAbs均能够与真核表达的重组Cap蛋白反应.选取3株杂交瘤细胞制备3株MAbs,小鼠腹水效价分别为1:409 600、1:204 800和1:409 600.利用3株MAbs对自然感染PCV3临床病猪的腹股沟淋巴结进行IHC检测,结果显示3株MAbs的腹水均能够与感染PCV3的临床样品发生特异性的免疫反应.本研究制备的MAbs具有较好的特异性,为深入研究Cap蛋白的结构和PCV3快速诊断奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2019年第2期|174-178|共5页
  • 作者单位

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

    江苏省研究生工作站;

    江苏泰州225511;

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

    江苏省研究生工作站;

    江苏泰州225511;

    农业部禽用生物制品创制重点实验室;

    江苏扬州225009;

    农业部畜禽传染病学重点开放实验室;

    江苏扬州225009;

    江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏扬州225009;

    扬州大学农业科技发展研究院;

    江苏扬州225009;

    扬州大学兽医学院;

    江苏扬州225009;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    猪圆环病毒3型; Cap蛋白; 单克隆抗体; 免疫组化;

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