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结核分枝杆菌TetR家族蛋白Rv3295新调控靶点及辅助因子的初步研究

         

摘要

为了验证rv3229c是否为结核分枝杆菌(MTB)的转录调控蛋白Rv3295的调控靶点,并研究哪些小分子对rv3229c与Rv3295蛋白的结合有影响,本研究通过PCR扩增MTB rv3295基因后构建了重组表达载体pET-22b-rv3295,经诱导后得到重组蛋白Rv3295.凝胶迁移试验(EMSA)和染色质免疫沉淀(ChIP)试验结果显示,Rv3295与rv3229c(desA3)启动子在体外与体内均能够结合.DNA大沟小沟结合试验表明,Rv3295与rv3229cDNA的大沟结合.通过EMSA小分子筛选,结果显示,小分子(VB1、VB3、VB6、 Vc)和金属离子(Fe3+和Zn2+)在体外均可降低Rv3295与rv3229c启动子区域的结合,而氨基酸及其它小分子对该结合无影响.分子对接试验表明Rv3295的Glu 67和Glu 105氨基酸残基在该蛋白质与小分子及金属离子的相互作用中起重要作用.以上试验结果表明rv3229c为TetR家族蛋白Rv3295新的调控靶点.本研究首次揭示了MTB中的Rv3295调控蛋白可直接调控rv3229c(desA3)的表达,进而参与油酸合成的调控.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2020年第7期|643-649|共7页
  • 作者单位

    黑龙江八一农垦大学动物科技学院 黑龙江大庆163000;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150069;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 病原细菌;
  • 关键词

    结核分枝杆菌; Rv3295; 转录调控; rv3229c;

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