靶向生存素基因的RNAi对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响

李长锋; 张斌; 王芳; 王志成; 杨海山

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靶向生存素基因的RNAi对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响

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目的构建靶向生存素（survivin）基因的RNA干扰（RNAi）载体,观察对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响,并探讨其机制。方法根据survivin的cDNA序列设计干扰序列,构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin。酶切、测序鉴定正确后,经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞;应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blot法检测survivin的表达;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;克隆形成实验检测细胞的放射敏感性。结果酶切和测序结果显示,载体构建正确;将质粒pGenesil2-survivin转染肺腺癌A549细胞48 h,survivin蛋白水平及mRNA水平在正常组与pGenesil2组中无明显变化,5 Gy照射组增强,而转染pGenesil2-survivin后明显抑制;pGenesil2-survivin与5 Gy X射线照射都能诱导细胞凋亡增加（t1=10.63,P＜0.001;t2=3.75,P＜0.05）,两者共同作用,凋亡增加更明显（t=4.83,P＜0.05）;克隆形成实验显示,pGenesil2与正常组D0、Dq无明显变化,而pGenesil2-survivin则明显降低,说明其可以提高A549细胞的放射敏感性。结论靶向生存素基因的RNAi能够明显抑制survivin mRNA与蛋白的表达,促进凋亡,增强A549细胞的放射敏感性。

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来源
《中华放射医学与防护杂志》 |2009年第3期||共页
作者
李长锋; 张斌; 王芳; 王志成; 杨海山;
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作者单位

1. 吉林大学中日联谊医院镜检科 2. 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类肺肿瘤;
关键词
RNA干扰; 生存素; 细胞凋亡; 放射敏感性;

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