体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法

尹寿新; 周震; 马美雪; 杨景波; 羊东晔

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体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法

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背景：肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干/祖细胞,但其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性。目的：探索大鼠肝卵圆细胞体外长期培养的方法。方法：构建2-乙酰胺基芴/部分肝切除肝再生大鼠模型,通过酶消化和Percoll梯度离心分离纯化大鼠异质卵圆细胞并进行免疫染色鉴定,用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外长期培养,后撤去表皮生长因子、白血病抑制因子,通过形态学的观察和分子标志物的检测判断其能否保持干/祖细胞活性。结果与结论：采用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外培养卵圆细胞4个月后,大鼠异质卵圆细胞仍能表达肝细胞标志物ALB、胆管上皮细胞标志物CK-19,经不含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养液继续培养后,卵圆细胞胎肝标志AFP表达量迅速下降。该研究结果表明大鼠肝卵圆细胞在表皮生长因子、白血病抑制因子等培养条件下可长期增殖并保持干细胞活性。

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来源
《中国组织工程研究》 |2014年第29期|P.4663-4668|共6页
作者
尹寿新; 周震; 马美雪; 杨景波; 羊东晔;
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作者单位

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原文格式 PDF
正文语种 CHI
中图分类生物医学工程;
关键词
肝细胞; 表皮生长因子; 白血病抑制因子; 细胞,培养的; 组织构建; 组织工程; 卵圆细胞; 长期培养; 国家自然科学基金;

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